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长链脂肪酸转运蛋白4抗体抗体的生物素化标记实验要点

2023-01-10

长链脂肪酸转运蛋白4抗体抗体的生物素化标记实验要点:

1. 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析;

2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件;

3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活;

4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等;

5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性;

6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合;

7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用;

8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。

小鼠细胞凋亡相关基因(mouse BCL-2) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠脑衍化神经营养因子(mouse BDNF) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠脑衍化神经营养因子受体(mouse BDNF R) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠骨成型蛋白-2(mouse BMP-2) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠骨成型蛋白-4(mouse BMP-4) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠骨成型蛋白受体1A(mouse BMP-R1A) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(mouse BMP-R2) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠脑钠肽(mouse BNP) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠N端前脑钠素(mouse NT-proBNP) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠骨唾液酸蛋白(mouse BSP) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠CXCL3(mouse CXCL-3) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠CXCR4(mouse CXCR-4) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠皮质酮(mouse Corticosterone) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠环氧化酶-2 (mouse COX-2) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠结缔组织生长因子(mouse CTGF) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 (mouse CTLA-4) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠细胞色素P450(mouse Cytochrome P450) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠C反应蛋白(mouse CRP) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠CXC趋化因子受体3(mouse CXCR3) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装