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牛巨细胞病毒探针法荧光定量PCR试剂盒反应五要素

2022-03-29

牛巨细胞病毒探针法荧光定量PCR试剂盒反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

人11去氢血栓烷B2(11-DH-TXB2)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human 11-DH-TXB2 (11-Dehydro-thromboxane B2) ELISA Kit
人12羟基二十烷四烯酸(12-HETE)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human 12-HETE (12-Hydroxyeicosatetraenoic Acid) ELISA Kit
人15脂加氧酶(15-LO)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human 15-LO (Arachidonate 15-Lipoxygenase) ELISA Kit
人16α羟基雌酮1(16-α OHE-1)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human 16-α OHE-1 (16-α Hydroxyestrogen 1) ELISA Kit
人β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human BACE1 (Beta-site APP Cleaving Enzyme 1) ELISA Kit
人白介素32(IL-32)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human IL-32 (Interleukin 32) ELISA Kit 
人肿瘤坏死因子受体超家族成员1A(TNFRSF1A)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human TNFRSF1A (Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 1A) ELISA Kit
人26S蛋白酶体(26S-PSM)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human 26S-PSM (26S Proteasome) ELISA Kit
人5羟基吲哚乙酸(5-HIAA)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human 5-HIAA (5-Hydroxyindolacetic Acid) ELISA Kit
人白介素15(IL-15)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human IL-15 (Interleukin 15) ELISA Kit 
人5脂加氧酶(5-LO)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human 5-LO (Arachidonate 5-Lipoxygenase) ELISA Kit
人5核苷酸酶(5-NT)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human 5-NT (5-Nucleotidase) ELISA Kit
人6酮前列腺素(6-K-PG)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human 6-K-PG (6-Keto-prostaglandin) ELISA Kit
人6-羟多巴胺(6-OHDA)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human 6-OHDA (6-Hydroxydopamine) ELISA Kit
人抗肌动蛋白抗体(AAA)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human AAA (Anti-Actin Antibody) ELISA Kit
人5羟基二十烷四烯酸(5-HETE)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human 5-HETE (5-Hydroxyeicosatetraenoic Acid) ELISA Kit
人抗白蛋白抗体(AAA)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human AAA (Anti-Albumin Antibody) ELISA Kit
人α1抗胰糜蛋白酶(α1ACT)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human α1ACT (Alpha1 Antichymotrypsin) ELISA Kit
人白介素16(IL-16)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human IL-16 (Interleukin 16) ELISA Kit 
人Apelin 17蛋白(AP17)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human AP17 (Apelin 17) ELISA Kit
人双调蛋白(AR)酶联免疫吸附测定试剂盒  Human AR (Amphiregulin) ELISA Kit
人抑制素A(INHA)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human INHA (Inhibin A) ELISA Kit