降落PCR和普通PCR有什么区别

普通PCR：
目的：在已知最佳反应条件（特别是退火温度）的情况下，对目标DNA进行常规扩增。
局限：如果退火温度设置不当，容易产生非特异性条带或引物二聚体。找到一个完美的退火温度有时需要通过梯度PCR进行多次摸索。
降落PCR：
目的：提高扩增的特异性，尤其是在引物特异性不佳、模板复杂（如基因组DNA）或最佳退火温度不明确的情况下。
优势：
特异性强：反应初期的高温阶段，只有与模板完全匹配的特异性引物才能结合并启动扩增，非特异性结合被有效抑制。
效率高：当温度降低到可能产生非特异性扩增的水平时，特异性产物已经通过前期的循环积累了巨大的数量优势。在后续的低温循环中，这些特异性产物会“竞争”掉非特异性位点，始终优先被扩增，从而获得单一、纯净的目标产物。
简化流程：无需通过梯度PCR反复摸索最佳退火温度，一次反应即可获得理想结果，节省了时间和试剂。