使用方法:

一、弧菌LAMP试剂盒50次稀释标准曲线样品（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。

1. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。

2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液，*用带芯枪头，下同）。

3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照（浓度为 1×10E8 拷贝/μL，试剂盒提供)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

4. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

5. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。

6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。

二、样品 DNA 的制备

7. 用自选方法纯化样品的 DNA，本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。

8. 如果有 N 个样品，则需要进行 N+2 个样品提取，多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。

三、设置 qPCR 反应（20μL 体系，在样品制备室进行）

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复，则标记 N+9 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），6 个用于标准曲线。如果做定性分析，并且只做 1 次重复，则标记 N+4 个 PCR 管，其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品，1 个用于 PCR 阴性对照（用水做模板），1 个用于PCR 阳性对照。

产品名称：弧菌LAMP试剂盒50次

英文名称：Lamp kit for Vibrio vulnificus

产品货号：GOY7803

产品规格：50次

产品保存：-20℃保存

产品有效期：一年

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

运输：低温、避光，快递免费送货上门。

PCR反应五要素：

　　参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 

　　引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。

　　设计引物应遵循以下原则：

　　①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

　　②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

　　③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 

　　④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

　　⑤引物3’端的碱基，特别是zui末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 

　　⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。

　　⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 

下列是弧菌LAMP试剂盒50次的相关热销产品：
荜澄茄素 CUBEBIN(RG)(PLEASE CALL)度：≥97%bFGF  碱性成纤维细胞生长子（多肽抗原

铬 CHROMIUM(III)PICOLINATE(SH)度：≥95%BGP(Bone Gla-protein

铬 CHROMIUM(III)PICOLINATE(P)度：≥95%Bid (BH3 interacting domain death agonist

铬 CHROMIUM(III)PICOLINATE(P)度：≥92%Biotin/BSA  生物素偶联牛血清白蛋白

苯扎铵(50%的水溶液) Benzalkonium Chloride (50% in Water)度：95%Biotin/KLH  生物素偶联血蓝蛋白

苯扎铵(50%的水溶液) Benzalkonium Chloride (50% in Water)度：97%BIRC5/Survivin variant  细胞凋亡抑制子4（抗原

苯亚基二二酯 Diethyl Benzylidenemalonate >96.0%(GC)度：95%BK channel (stretch-activated Kca channel

苯亚 CHALCONE(RG)度：≥95%BKCa channels(calcium-activated potassium channel

山柰酚3O芸香糖苷 CAS号：  规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

鸭脚树叶碱 CAS号： 4684326 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

表木栓 CAS号： 16844716 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

路路通 CAS号： 4481623 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

胡麻属苷 CAS号： 117479875 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

次野鸢尾黄素 CAS号： 41743731 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

石吊兰素 CAS号：  规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

白头翁皂苷B4 CAS号： 129741577 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

二欧山芹当归 CAS号： 5058139 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

紫菀 CAS号： 10376484 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

白鲜碱 CAS号： 484297 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

q CAS号： 28808620 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

格列风内 CAS号： 61371559 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

紫草苷 CAS号： 63492693 规格： HPLC≥96%;20mg 订购|咨询

菝葜皂苷元 CAS号： 126192 规格： HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
弧菌LAMP试剂盒50次 蛋白激酶MST2抗体  

乳糖发酵培养基  英文名称：Lactose fermentation medium   保存：-20℃   规格：3.0g /100mL，20袋/盒

 DNA结合蛋白C抗体  

四钠亮绿对照培养基基础  英文名称：Four sulfonic acid sodium light green contrast medium base   保存：-20℃   规格：4.5g/100ml

 促黑细胞激素γ抗体  

哥伦比亚琼脂对照培养基  英文名称：The control Columbia agar culture medium   保存：-20℃   规格：13.2g/300ml

 胃粘液素抗体  

化十六基琼脂对照培养基  英文名称：Sixteen alkyl trimethyl amine bromide agar control medium   保存：-20℃   规格：13.6g /300mL，20袋/盒

 基抗体  

绿脓菌素测定用对照培养基基础  英文名称：Pyocyanin determined by contrast medium base   保存：-20℃   规格：13.9g/300ml

 相关蛋白MIC1抗体  

念珠菌显色对照培养基  英文名称：Candida color contrast medium   保存：-20℃   规格：4.8g/100ml

 组织相容性复合体β抗体  

沙氏葡萄糖琼脂对照培养基  英文名称：Sabouraud dextrose agar control medium   保存：-20℃   规格：19.5g/300ml

 Myc基因相关蛋白抗体  

沙门、志贺菌属琼脂对照培养基  英文名称：Salmonella, Shigella Agar control medium   保存：-20℃   规格：18.0g/300ml 
技术保护点:

一种用于检测螺旋体的LAMP引物组，其特征在于，包括一对外引物和一对内引物，其中，所述外引物的核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的正向外引物和反向外引物，所述内引物的核苷酸序列分别为SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的正向内引物和反向内引物。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！