大鼠B因子(BF)elisa试剂盒 英文名称： Rat factor B,BF ELISA Kit 产品简称： BFelisa试剂盒 英文简称： BF elisa Kit 采用的全是原材料研，发灵敏性高，高效性，原装抗体，吸附均匀、吸附性好，回收利用率高、可靠性强，无效包退包换，公司提供免费代测服务，各种种属ELISA试剂盒产品齐全，质量可靠。

试验所需自备物品:

1.  酶标仪(450nm波长滤光片)

2.  高精度移液器，EP管及一次性吸头：0.5-10μl, 2-20μl, 20-200μl, 200-1000μl

3.  37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水

4.  吸水纸

大鼠B因子(BF)elisa试剂盒1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。

2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

注意事项：

1.加样：

①实验样本过多时，可分批次操作，以减少实验时间延长造成的误差；

大鼠B因子(BF)elisa试剂盒②加酶试剂后，用吸水纸吸干孔外试剂；

③作定量试验时，使用加样器加注试剂，并经常校正其准确性，此外，要做到一份样本一个移液头，防止交叉污染。

2.温育：

①如有两种温度，尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件；

②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察；

③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”，因此尽量采用水浴；

3.洗板：

①手工洗板时，拍板时要垂直，避免交叉污染，用力不能过猛，防止抗原抗体复合物脱离；

②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅，若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出；

③为了洗涤效果好，实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法，在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次，或适当增加洗板的次数；

4.显色：

ELISA试剂盒中，如以四甲基联苯胺(TMB)为底物，则提供的底物为A和B两瓶应用液；如以邻苯二胺(OPD)为底物，则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂，要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光，但A、B液应尽量避免接触金属器械。

5.判定：

读取结果要在15-30 min内完成，定性测定用肉眼判读试验结果时，反应板应水平距离白色背景10-15 cm；定量测定时用酶标仪读取结果，酶标仪不应置于阳光或强光照射下，需先预热15-30 min再进行测试。
操作步骤：

1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）

2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，

3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同 3。

8.洗涤：操作同 5。

9.显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.

10.终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。

Wnt1信号通路蛋白3抗体 WISP3

伴综合征相关蛋白抗体 WASP

WDR68蛋白抗体 WDR68

WDR91蛋白抗体 WDR91

P53应答基因蛋白5抗体 WFDC5

WD重复膜蛋白19抗体 WDR19

磷酸化WEE1蛋白抗体 Phospho-Wee1

糖类应答元件结合蛋白ChREBP抗体 WBSCR14

肾母细胞瘤蛋白抗体 Wilms Tumor Protein

信号通路Wnt16抗体 Wnt16

WDR23蛋白抗体 WDR23

端粒酶卡哈尔体蛋白抗体 TCAB1

信号通路WNT10B抗体 WNT10B

EBV核蛋白2抗体 WAPL

Wnt信号受体蛋白抗体 Wnt receptor

富含脯氨酸同源蛋白1抗体 WAVE 1

原癌基因WIP1抗体 PPM1D

信号通路Wnt2B抗体 WNT2B

大鼠B因子(BF)elisa试剂盒WEE1蛋白抗体 WEE1 protein

WRCH1抗体 WRCH-1

丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员的基因WNK3抗体 WNK3 protein

信号通路Wnt9a抗体 WNT9A

Wnt1信号通路蛋白1抗体 WISP1

WASP结合蛋白抗体 WIPF2

野生型P53诱导基因1抗体 PAG608

Verprolin同源结构域包含蛋白3抗体 WASF3

信号通路Wnt11抗体 Wnt11

信号传导抑制蛋白WD重复蛋白2抗体 WD SOCS box protein 2

WW结构域E3泛素连接酶1抗体 WWP1

WD重复蛋白16抗体 WDR16

赖氨酸缺陷型蛋白激酶1抗体 WNK1

磷酸化WEE1蛋白抗体 Phospho-Wee1

Wnt信号抑制因子1抗体 WIF1

结缔组织生长因子样蛋白抗体 WISP2

原癌基因wnt7a蛋白抗体 WNT7A

信号通路WNT10A抗体 WNT10A

信号通路Wnt5a抗体 WNT5A

p21调控蛋白WISP39抗体 WISP39

野生型P53诱导基因1抗体 PAG608

预处理正调节蛋白2抗体 WDR26

Wolfram综合征蛋白1抗体 WFS1

磷酸化赖氨酸缺陷型蛋白激酶1抗体 Phospho-WNK1

WNK4抗体 WNK4

包含氧化还原酶的WW域抗体 WWOX