猪D-乳酸脱氢酶(D-LDH)elisa试剂盒 英文名称： Pig D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA Kit 产品简称： D-LDHelisa试剂盒 英文简称： D-LDH elisa Kit 采用的全是原材料研，发灵敏性高，高效性，原装抗体，吸附均匀、吸附性好，回收利用率高、可靠性强，无效包退包换，公司提供免费代测服务，各种种属ELISA试剂盒产品齐全，质量可靠。

试验所需自备物品:

1.  酶标仪(450nm波长滤光片)

2.  高精度移液器，EP管及一次性吸头：0.5-10μl, 2-20μl, 20-200μl, 200-1000μl

3.  37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水

4.  吸水纸

试剂配制

1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。

2猪D-乳酸脱氢酶(D-LDH)elisa试剂盒、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

注意事项：

1.加样：

①实验样本过多时，可分批次操作，以减少实验时间延长造成的误差；

②加酶试剂后，用吸水纸吸干孔外试剂；

③作定量试验时，使用加样器加注试剂，并经常校正其准确性，此外，要做到一份样本一个移液头，防止交叉污染。

猪D-乳酸脱氢酶(D-LDH)elisa试剂盒2.温育：

①如有两种温度，尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件；

②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察；

③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”，因此尽量采用水浴；

3.洗板：

①手工洗板时，拍板时要垂直，避免交叉污染，用力不能过猛，防止抗原抗体复合物脱离；

②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅，若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出；

③为了洗涤效果好，实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法，在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次，或适当增加洗板的次数；

4.显色：

ELISA试剂盒中，如以四甲基联苯胺(TMB)为底物，则提供的底物为A和B两瓶应用液；如以邻苯二胺(OPD)为底物，则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂，要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光，但A、B液应尽量避免接触金属器械。

5.判定：

读取结果要在15-30 min内完成，定性测定用肉眼判读试验结果时，反应板应水平距离白色背景10-15 cm；定量测定时用酶标仪读取结果，酶标仪不应置于阳光或强光照射下，需先预热15-30 min再进行测试。

操作步骤：

1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）

2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，

3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。

4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。

5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同 3。

8.洗涤：操作同 5。

9.显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.

10.终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。

Annexin A2 膜粘连蛋白 Ⅱ抗体

ATF1 活化转录因子1抗体

Aquaporin 4 水通道蛋白4抗体

ATF2 活化复制因子2抗体

AMPK beta 1 腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体

Amylin 相关肽/胰岛淀粉样肽抗体

Angiotensin II 紧张素Ⅱ抗体

AT2R 紧张素Ⅱ受体1抗体

Angiopoietin-1 生成素-1抗体

Annexin V 膜粘连蛋白5抗体

Annexin V 重组膜粘连蛋白5抗体

alpha Adaptin 衔接蛋白α-Adaptin抗体

APAF1(CT) 凋亡蛋白活性因子-1抗体（C端）

APAF1(NT) 凋亡蛋白活性因子-1抗体（N端）

ABCG2 三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体

APOE 载脂蛋白E抗体

Amyloid Precursor Protein 淀粉样肽前体蛋白抗体

Aquaporin 2 水通道蛋白-2抗体

AGT 紧张素原抗体

Androgen receptor 雄激素受体抗体

AVEN 细胞死亡调节蛋白抗体(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制剂)

Axin1 轴蛋白1抗体

ATG9B 自噬相关蛋白9B抗体

Apg12 自噬相关蛋白12抗体

ATG13 自噬相关蛋白13抗体

ATG3 自噬相关蛋白3抗体

ADAMTS4 整合素样金属蛋白酶与凝血酶4型抗体

phospho-ATF2 (Ser490/498) 磷酸化活化复制因子2抗体

phospho-Amyloid Precursor Protein (Tyr757) 磷酸化APP(Tyr757)淀粉样肽前体蛋白抗体

ACTR 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶ATR抗体

ADAM18 去整合素样金属蛋白酶18抗体

猪D-乳酸脱氢酶(D-LDH)elisa试剂盒ATF6 活化转录因子6抗体

AP2 beta 衔接蛋白β抗体

Gamma-Adaptin 衔接蛋白γ/γ-Adaptin抗体

AQP9 水通道蛋白-9抗体

Annexin A3 膜粘连蛋白A3抗体