组成及试剂配制:

1、 酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3、高致病性猪生殖与呼吸综合症病毒PCR检测试剂盒说明书 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

产品介绍：

产品名称：高致病性猪生殖与呼吸综合症病毒PCR检测试剂盒说明书

英文名称：Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(PRRSV)RTPCR

编号：GOY-P0597

样本采集、存放及运输：

1、高致病性猪生殖与呼吸综合症病毒PCR检测试剂盒说明书样本采集：各类型样本按照常规方法采集；

2、存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（zui多冻融3次）；

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：

    1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。

    2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。

    3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。

    4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。

    5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。

    6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。

使用方法：

注：所有试剂使用前需完全解冻，混合均匀，6,000rpm离心数秒后使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等，具体提取方法请参照相关说明书；阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。

组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s，转移至样本处理区。

2.加样（样本处理区）

3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。

卵磷脂吐温稀释液 250g 用于样品制备水稀释

Lecithin polysorbate(LP)diluent

M-Endo肉汤 250g 用于滤膜法计数水中大肠菌群

M-Endo Broth

CCFA琼脂基础 250g 用于艰难梭菌选择性分离培养

CCFA Agar Base

CAYE培养基 250g 用于致病性大肠埃希氏菌的产毒培养

CAYE Medium

结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA） 5kg 用于大肠菌群的固体平板检测(GB、SN标准)

阪崎肠杆菌检验培养基

胰蛋白胨大豆琼脂（TSA） 250g 用于奶粉中阪崎杆菌的纯化培养和产黄色素试验(GB、SN标准)

TSA Agar

阪崎杆菌显色培养基 1000ml 用于阪崎杆菌的显色培养，阪崎杆菌显蓝色，其它肠杆菌显无色

Enterobacter Sakazakii Chromogenic Medium

改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素（mLST-Vm） 250g 用于阪崎杆菌选择性增菌培养（GB标准）

Modified lauryl sulfate tryptose vancomycin medium

万古霉素溶液 1mg*5支 每支加入100mlHB0102-2中（GB标准）

Vancomycin Solution

阪崎肠杆菌显色培养基（DFI琼脂） 1000ml 用于阪崎杆菌的显色培养，阪崎杆菌显蓝色，其它肠杆菌显无色。

Enterobacter Sakazakii Chromogenic Medium

结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂（VRBGA） 250g 用于奶粉中阪崎杆菌的分离培养(FDA、SN方法)

高致病性猪生殖与呼吸综合症病毒PCR检测试剂盒说明书VRBG Agar

肠道菌增菌肉汤（EE） 250g 用于肠道菌的增菌培养(FDA、SN 标准)

Enterobacteria Enrichment Broth

西蒙氏枸橼酸盐培养基 250g 用于肠道菌的柠檬酸盐利用试验(GB标准)

Simmons Citrate Medium

阪崎肠杆菌成套生化鉴定管 11种*2套/盒*5盒 用于阪崎杆菌的生化试验

biochemical identification of sets of tubes