以下是小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒说明书产品说明：

小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒说明书【Mouse Bladder PrimaCell: Normal Bladder Smooth Muscle Cells】

膀胱是一个储尿器官。在哺乳类，它是由平滑肌组成的一个囊形结构，位于骨盆内，其后端开口与尿道相通。膀胱与尿道的交界处有括约肌，可以控制尿液的排出其中，小鼠膀胱平滑肌细胞分离自正常小鼠膀胱平滑肌组织。膀胱是由平滑肌细胞组成的中空器官。人膀胱平滑肌细胞传10代以上仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和。 虽然膀胱平滑肌组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的膀胱平滑肌组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的平滑肌组织片能使得膀胱平滑肌组织中细胞的一些功能特性发生改变，从而将膀胱平滑肌细胞分离开来。
本试剂盒适用于分离培养小鼠膀胱平滑肌细胞。本体系提供了*的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以*程度地降低所培养的膀胱平滑肌原代细胞中成纤维细胞的含量。 小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒适合于培养小鼠的膀胱平滑肌细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM小鼠膀胱平滑肌细胞组织解离液(3×1ml) （2）小鼠膀胱平滑肌细胞组织处理缓冲液 (100ml) （3）FibrOutTM小鼠膀胱平滑肌细
注意事项：
冻存细胞接收后小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒说明书的处理：

1.干冰运输，收到细胞后立即转入-80℃冰箱短暂中转或直接复苏；

2.收到细胞后，若发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联系。

复苏细胞接收后的处理：

1.收到细胞后，请首先检查培养瓶是否破损或漏液，培养液是否混浊，如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们。

2.75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后，在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片，若有贴壁细胞脱落，可收集上清离心，将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。

3.建议收到当天不要消化处理，如果细胞长满90%，可选择传代处理。

4.如您收到细胞3天内没有反馈相关问题，出现的细胞问题将不提供免费重发服务。

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250mLCasein Blocking Buffer in PBS（酪蛋白封堵剂） Casein Blocking Buffer in PBS常温保存

250mLCasein Blocking Buffer in TBS with azide（酪蛋白封堵剂） Casein Blocking Buffer in TBS with azide常温保存

250mLCasein Blocking Buffer in TBS（酪蛋白封堵剂）Casein Blocking Buffer in TBS常温保存

250mLCasein-Tween-20 in PBS Casein-Tween-20 in PBS 常温保存

250mLCasein-Tween-20 in TBS Casein-Tween-20 in TBS 常温保存

50mLChaps Lysis Buffer Chaps Lysis Buffer 常温保存

25mLChaps Lysis Buffer,2X Chaps Lysis Buffer,2X 常温保存

100mLCHES Buffer,0.5M,pH10.0  CHES Buffer,0.5M,pH10.0  常温保存

100mLCHES Buffer,0.5M,pH8.5  CHES Buffer,0.5M,pH8.5  常温保存

100mLCHES Buffer,0.5M,pH9.0  CHES Buffer,0.5M,pH9.0  常温保存

100mLCHES Buffer,0.5M,pH9.5  CHES Buffer,0.5M,pH9.5  常温保存

250mLCitrate Buffer（柠檬酸盐缓冲液）,0.5M,pH2.5  Citrate Buffer,0.5M,pH2.5  常温保存

250mLCitrate Buffer（柠檬酸盐缓冲液）,0.5M,pH3.0  Citrate Buffer,0.5M,pH3.0  常温保存

250mLCitrate Buffer（柠檬酸盐缓冲液）,0.5M,pH3.5  Citrate Buffer,0.5M,pH3.5  常温保存

250mLCitrate Buffer（柠檬酸盐缓冲液）,0.5M,pH4.0  Citrate Buffer,0.5M,pH4.0  常温保存

250mLCitrate Buffer（柠檬酸盐缓冲液）,0.5M,pH4.5  Citrate Buffer,0.5M,pH4.5  常温保存

250mLCitrate Buffer（柠檬酸盐缓冲液）,0.5M,pH5.0  Citrate Buffer,0.5M,pH5.0  常温保存

250mLCitrate Buffer（柠檬酸盐缓冲液）,0.5M,pH5.5  Citrate Buffer,0.5M,pH5.5  常温保存

小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒说明书G蛋白偶联受体33抗体 GPCR6A

G蛋白偶联受体C5B抗体 GPRC5B

谷氨酸受体红藻氨酸离子1抗体 GRIK1

一般受体磷酸肌醇相关支架蛋白1抗体 GRASP

谷氨酸受体红藻氨酸离子5抗体 GRIK5

棕榈酰转移酶GODZ抗体 GODZ

G蛋白信号调节蛋白1抗体 GPSM1

G氨基丁酸受体β2+3/GABAA Rβ2+GABAA Rβ2抗体 GABA A Receptor beta 2 + 3

G蛋白β样蛋白抗体 G protein beta subunit like

通用转录因子GTF2B抗体 GTF2B

G蛋白α抗体 G protein alpha

磷酸化gp130抗体 phospho-gp130 (Ser782)
细胞培养方法：

1、小鼠膀胱平滑肌细胞培养试剂盒说明书细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。