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产地 | 国产 |
保存条件 | 低温冷藏 |
品牌 | 谷研 |
货号 | GOY-01X0003 |
用途 | 仅供科研实验 |
组织来源 | 胚胎肾 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
是否是肿瘤细胞 | 否 |
保质期 | 详见说明书 |
器官来源 | |
免疫类型 | 转化细胞系 |
品系 | 细胞系 |
生长状态 | 贴壁细胞 |
物种来源 | 人 |
包装规格 | T25培养瓶 |
是否进口 | 否 |
293A细胞,人胚肾细胞系293A
产品别名 | 293A细胞,人胚肾细胞系293A | 鉴定 | STR鉴定正确 |
生长特性 | 贴壁细胞 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
种属 | 人 | 货号 | GOY-01X0003 |
规格 | 1×10?cells/T25培养瓶 | 英文名称 | 293A |
别称 HEK-293A; HEK293A; HEK 293A; 293A; QBI-HEK 293A; QBI-293A
种属 人类
年龄(性别) 胎儿
组织来源 胚胎肾
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
生物安全等级 1
生长培养基 DMEM+10% FBS+1% P/S
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
倍增时间 ~40-60小时
冻存条件
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
注意事项 该细胞贴壁松散,操作时请尽量轻柔;换液时需预热培养基;收货如有大块脱落的细胞团,为正常现象,请按照收货注意事项处理。
1、将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次;
2、PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中,注意收集PBS;
3、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL);
4、将培养瓶放入37度培养箱消化(1到2分钟,难消化的细胞适当增加时间);
5、消化到细胞大部分变圆并脱落,轻敲培养瓶后加入3-4ml完培终止消化;
6、混匀细胞吸出,1000rpm离心3-5min,弃上清;补加1-2ml完培吹匀;
7、按1:2分配到新的培养瓶中,添加6-8ml完培保持细胞生长;
01细胞贴壁较弱
细胞贴壁比较弱,因此在遇到运输低温及震荡、室温静置太长时间、添加的培养基或其他试剂过冷、密度较高、聚集未吹散、加液吹打到细胞面等情况时会出现明显的成片脱落现象,此时若脱落现象不严重应尽快放回培养基继续培养,若呈大片脱落的情况时需要收集细胞重新消化吹散并接种;
建议使用经过包被或者高贴壁培养瓶培养细胞,尽量避免接触低温或密度过高;
02细胞本身偏嗜酸性,消耗培养基较快
细胞在略微偏酸性的环境下生长状态会比偏碱性的好,注意培养基pH控制;
细胞密度达到70%以上时,培养基消耗会很快,主意及时观察并换液;
03细胞生长聚集成岛状
细胞呈岛状聚集生长,逐步向外侧扩散直至完全融合;
04细胞聚团后很难再吹散
细胞传代过程中一定要注意吹散细胞,接种密度不要过高,否则接种后细胞聚团将很难再吹散,会形成类似球状的聚集体贴壁生长,培养条件合适的情况下细胞会逐渐摊开生长,但若培养条件无法有效贴壁,可能会长时间呈球状增殖;
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