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产地 | 国产 |
品牌 | 谷研 |
货号 | GOY-SH283 |
用途 | 仅供科研实验 |
英文名称 | |
包装规格 | 100管/96样 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
别名 | 山梨醇含量测试盒 |
分子式 | |
是否进口 | 否 |
山梨醇含量测试盒微量法
商品属性:
检测方法 |
规格 |
货号 |
微量法 |
100管/96样 |
GOY-SH283 |
测定意义:
山梨醇广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,不仅是糖运输形式之一,而且与生物
抗逆性和食物风味密切相关。因此,在糖代谢、抗逆性和食品研究中经常需要检测山梨醇含
量变化。
测定原理:
山梨醇在碱性溶液中与铜离子形成蓝色络合物,在 655nm 波长有特征吸收峰。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 3.5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 3.5mL×1 瓶 ,4℃保存。
提取:
按照组织质量(g):蒸馏水体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL
蒸馏水),研磨成匀浆,95℃水浴 10 分钟(盖紧,以防止水分散失),冷却后,8000g,25℃
离心 10min,取上清液待测。
测定操作:
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 655nm,蒸馏水调零。
2、加样表(在 EP 管中依次加入下列试剂):
试剂(μL) 空白管 测定管
试剂一 35 35
试剂二 35 35
样本 230
蒸馏水 230
混匀后室温静置 15min,8000g,25℃离心 10min,取 200μL 上清液至微量石英比色皿或 96
孔板中,测 655nm 下吸光值 A,计算 ΔA=A 测定管-A 空白管。空白管只要做一管。
计算公式:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、标准条件下测定回归方程为 y = 0.352x - 0.002;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。
2、按照样品质量计算
山梨醇含量(mg /g 鲜重)=[(ΔA+0.002) ÷0.352×V1]÷(W×V1÷V2)=2.84×(ΔA+0.002) ÷W
3、按照样本蛋白浓度计算
山梨醇含量(mg /mg prot)=[(ΔA+0.002) ÷0.352×V1]÷(V1×Cpr)=2.84×(ΔA+0.002) ÷Cpr
V1:加入样本体积,0.23mL;V2:加入提取液体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;
W:样本质量,g
b.用 96 孔板测定的计算公式如下
1、标准条件下测定回归方程为 y = 0.176x - 0.002;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。
2、按照样品质量计算
山梨醇含量(mg /g 鲜重)=[(ΔA+0.002) ÷0.176×V1]÷(W×V1÷V2)=5.68×(ΔA+0.002) ÷W
3、按照样本蛋白浓度计算
山梨醇含量(mg /mg prot)=[(ΔA+0.002) ÷0.176×V1]÷(V1×Cpr)=5.68×(ΔA+0.002) ÷Cpr
V1:加入样本体积,0.23mL;V2:加入提取液体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;
W:样本质量,g
注意: 检测限为 1μg/g 鲜重或 0.01μg /mg prot
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