土壤N乙酰βD葡萄糖苷酶(SNAG)测试盒荧光法

商品属性：

测定意义：

土壤 N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）是溶酶体中的一种酸性水解酶，由土壤微生物分 泌。在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能，S-NAG 活性变化与机体某些病理状 态密切相关。
测定原理：

4-羟甲基-7-香豆素(MUB)在 365 nm 波长处激发, 能在 470 nm 处检测到荧光, 它与某些物 质结合后荧光特性消失, 通过酶的水解作用MUB释放出来, 通过检测荧光量来表征酶活性。 自备仪器和用品： 多功能酶标仪、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水。
试剂组成和配制：

试剂一：液体 120mL×1 瓶，4℃保存。 试剂二：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。用前加 11 mL 蒸馏水充分溶解（可 50℃震荡溶解）。 试剂三：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。
提取：
 新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30~50 目筛。按照土壤质量（g）：试剂一 mL)为 1： 5~10 的比例（建议称取约 0.1g 土壤，加入 1mL 试剂一），振荡混匀。
测定操作：
 1. 测定管：在震荡条件下取 100 μL 土壤悬液到 EP 管中，加入 100 μL 试剂二，30℃震 荡避光培养 3 h，从中吸取 134 μL 到黑色不透光 96 孔板中，加入 66 μL 试剂三后用多功 能酶标仪进行检测，激发光波长 365 nm，测定波长 470nm。 2. 对照管：取 100 μL 蒸馏水到 EP 管中，加入 100 μL 试剂二，30℃震荡避光培养 3 h， 从中吸取 134 μL 到黑色不透光 96 孔板中，加入 66 μL 试剂三后用多功能酶标仪进行检 测，激发光波长 365 nm，测定波长 470nm。 ΔA=A 测定-A 对照 注意：对照管只需测定一次。
计算公式：
 标准曲线：y = 62629x - 2266.4 R2 = 0.9996 x：MUB 标准品浓度（nmol/mL） y：荧光强度 酶活（nmol/h /g 土样）=(ΔA+2266.4)÷62629×V÷T÷W =(ΔA+2266.4)÷187887÷W V：提取液体积，1 mL；W：土壤样品质量，g；T：催化反应时间，3 h。
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