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产地 | 国产 |
品牌 | 谷研 |
货号 | GOY-SH306-B |
用途 | 仅供科研实验 |
英文名称 | SNAG |
包装规格 | 50管/24样 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
别名 | 土壤N乙酰βD葡萄糖苷酶(SNAG)测试盒 |
分子式 | |
是否进口 | 否 |
土壤N乙酰βD葡萄糖苷酶(SNAG)测试盒可见分光光度法
商品属性:
检测方法 |
规格 |
货号 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
GOY-SH306-B |
测定意义:
S-NAG 是溶酶体中的一种酸性水解酶,由土壤微生物分泌。S-NAG 活性变化与机体某些病
理状态密切相关。
测定原理:
S-NAG 分解 β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在 400nm 有 吸收峰,通过
测定吸光值升高速率来计算 NAG 活性。
自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、甲苯(不允许
快递)和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:甲苯 5mL×1 瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×2 瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入 6mL 蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试
剂仍-20℃保存;
试剂三:液体 25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;
样品处理:
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。
测定操作:
试剂名称 测定管 对照管
风干土样(g) 0.05 0.05
试剂一(μL) 25 25
室温振荡混匀 15min 90℃振荡混匀 15min
试剂二(μL) 400
蒸馏水(μL) 400
试剂三(μL) 500 500
混匀, 37℃振荡反应 1h 后,立即 90℃水浴 5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却
10000g 25℃离心 10min,取上清液
上清液(μL) 500 500
试剂四(μL) 1000 1000
充分混匀,室温静置 2min 后,400nm 处蒸馏水调零,测定吸光值 A,计算 ΔA=A 测定管-A
对照管。每个测定管设一个对照管。
计算公式:
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.00645x -0.0054;x 为标准品浓度(μmol/L),y 为吸光值。
单位的定义:每天每 g 土样中产生 1 μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-NAG 活力(μmol/d/g 土样)= (ΔA+0.0054) ÷0.00645×V 反总÷W÷T =68.84×(ΔA+0.0054)
T:反应时间,1h=1/24d; V 反总:反应体系总体积:9.25×10-4
L;W:样本质量,0.05g。
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