土壤N乙酰βD葡萄糖苷酶(SNAG)测试盒微量法

商品属性：

测定意义：

S-NAG 是溶酶体中的一种酸性水解酶，由土壤微生物分泌。S-NAG 活性变化与机体某些病 理状态密切相关。
测定原理：

S-NAG 分解 β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在 400nm 有 吸收峰，通过 测定吸光值升高速率来计算 NAG 活性。 自备用品： 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、 甲苯（不允许快递）和蒸馏水。 
试剂组成和配制：

试剂一：甲苯 5mL×1 瓶，4℃保存；（自备） 试剂二：粉剂×1 瓶，-20℃保存；临用前加入 10mL 蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂 仍-20℃保存； 试剂三：液体 20mL×1 瓶，4℃保存； 试剂四：液体 15mL×1 瓶，4℃保存；
样品处理：
 新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。
测定操作：
 1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 400nm，蒸馏水调零。 2、加样表 试剂名称 测定管 对照管 风干土样（g） 0.02 0.02 试剂一（μL） 10 10 室温振荡混匀 15min 90℃振荡混匀 15min 试剂二（μL） 130 蒸馏水 130 试剂三（μL） 160 160 混匀， 37℃振荡反应 1h 后，90℃水浴 5min（盖紧，防止水分散失），流水冷却， 10000g 25℃离心 10min，取上清液（在 EP 管或 96 孔板中加入下列试剂） 上清液（μL） 70 70 试剂四（μL） 130 130 充分混匀，室温静置 2min 后， 400nm 处测定吸光值 A，计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每 个测定管设一个对照管。 
计算公式：
 a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下 标准条件下测定的回归方程为 y = 0.00645x -0.0054；x 为标准品浓度（μmol/L），y 为吸光值。单位的定义：每天每 g 土样中产生 1 μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。 S-NAG 活力（μmol/d/g 土样）＝ (ΔA+0.0054) ÷0.00645×V 反总÷W÷T =55.81×(ΔA+0.0054) T：反应时间，1h=1/24d； V 反总：反应体系总体积：3×10-4 L；W：样本质量，0.02g。 b.用 96 孔板测定的计算公式如下 标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0043x -0.0054；x 为标准品浓度（μmol/L），y 为吸光值。 单位的定义：每天每 g 土样中产生 1 μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。 S-NAG 活力（μmol/d/g 土样）＝ (ΔA+0.0054) ÷0.0043×V 反总÷W÷T =83.72×(ΔA+0.0054) T：反应时间，1h=1/24d； V 反总：反应体系总体积：3×10-4 L；W：样本质量，0.02g。
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