土壤外切β1，4葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(SC1)测试盒微量法

商品属性：

测定意义：

C1（EC3.2.1.91）存在于细菌、真菌和动物体内，是纤维素酶系的组份之一，C1催化多聚糖 链的末端非还原端释放出纤维二糖和葡萄糖。
测定原理：

采用3,5－二硝基水杨酸法测定S-C1催化微晶纤维素降解产生的还原糖的含量。 需自备的仪器和用品： 酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、96 孔板/微量石英比色皿、研钵、 冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：

提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存； 试剂一：液体 6mL×1 瓶，4℃保存； 试剂二：液体 25mL×1 瓶，4℃保存； 
样品测定的准备：
 称取约 0.1g 新鲜土样或风干土样，加入 1mL 提取液，进行冰浴匀浆，室温振荡提取 30min， 然后 10000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。 
测定操作：
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 540nm，蒸馏水调零。 2、加样表（在 EP 管中依次加入下列试剂）： 混匀，37℃准确水浴 2h 试剂二 200 200 混匀， 90℃水浴 10min（盖紧，防止水分散失），冷却后，取 200μL 至微量石英比色皿或 96 孔板中，测 540nm 下吸光值 A，计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照 管。 
计算公式：
 a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下 标准条件下测定回归方程为 y = 6.4078x - 0.0673；x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。 单位的定义：每 g 土样每分钟催化产生 1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。 S-C1 活力(μg /min /g 鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V 反总]÷(W× V 样÷V 样总) ÷T =14.305×(ΔA+0.0673) ÷W 1000：1mg/mL=1000ug/mL；V 反总：反应体系总体积，0.11mL； V 样：加入样本体积， 0.01 mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，120 min； W：样本质量，g；b.用 96 孔板测定的计算公式如下 标准条件下测定回归方程为 y = 3.2039x - 0.0673；x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。 单位的定义：每 g 组织每分钟催化产生 1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。 S-C1 活力(μg /min /g 鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷3.2039×V 反总]÷(W× V 样÷V 样总) ÷T =28.61×(ΔA+0.0673) ÷W 1000：1mg/mL=1000ug/mL；V 反总：反应体系总体积，0.11mL； V 样：加入样本体积， 0.01 mL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，120 min； W：样本质量，g。
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