土壤脲酶(SUE)测试盒微量法

商品属性：

测定意义：

S-UE能够水解尿素，产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、 全氮和 氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。
测定原理：

利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的 NH3-N。 需自备的仪器和用品： 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯（不允许 快递）和蒸馏水。 
试剂组成和配制：

试剂一：甲苯 2mL×1 瓶，4℃保存；（自备） 试剂二：粉剂×1 瓶，临用前加入 9mL 蒸馏水，充分溶解待用，4℃保存；用不完的试剂 4℃ 保存； 试剂三：液体 22mL×1 瓶，4℃保存； 试剂四 A 液：液体×1 支，4℃保存；试剂四 B 液：液体×1 瓶，4℃保存；临用前将 A 液倒 入 B 液中混合，待用；用不完的试剂 4℃保存一周； 试剂五：液体 2mL×1 瓶，4℃保存； 
样品处理：
 新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。
测定操作：
 1 、培养 测定管 对照管 风干土样(g) 0.05 0.05 试剂一（μL） 20 20 振荡混匀，室温放置 15min 试剂二（μL） 90 蒸馏水（μL） 90 试剂三（μL） 190 190 混匀，放入 37℃水浴培养 24h 后，10000g 25℃离心 10min，取上清液。 2、将培养结束的上清液稀释 10 倍（取 0.1mL 上清液，加入 0.9mL 蒸馏水）。 3、测氨量（在微量石英比色皿或 96 孔板中加入下列试剂） 测定管 对照管 稀释后的上清液（μL） 80 80 试剂四（μL） 15 15 试剂五（μL） 15 15 充分混匀，室温放置 20min 蒸馏水（μL） 90 90 混匀，于 578nm 处，蒸馏水调零，读吸光值 A，计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管 设一个对照管。
计算公式：
 a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下 标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0915x +0.0373；x 为标准品浓度（μg/mL），y 为吸光值 A。 单位的定义：每天每 g 土样中产生 1μg NH3-N 定义为一个酶活力单位。 脲酶活力（μg/d/g 土样）＝(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V 反总÷W÷T =656×(ΔA -0.0373) 10：稀释倍数；T：反应时间，1d； V 反总：反应体系总体积：0.3mL；W：样本质量，0.05g。 b.用 96 孔板测定的计算公式如下 标准条件下测定的回归方程为 y = 0.04575x +0.0373；x 为标准品浓度（μg/mL），y 为吸光值 A。 单位的定义：每天每 g 土样中产生 1μg NH3-N 定义为一个酶活力单位。 脲酶活力（μg/d /g 土样）＝(ΔA-0.0373) ÷0.04575×10×V 反总÷W÷T =1312×(ΔA -0.0373) 10：稀释倍数；T：反应时间，1d； V 反总：反应体系总体积：0.3mL；W：样本质量，0.05g。
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