土壤漆酶测试盒微量法

商品属性：

测定意义：

漆酶（Laccase）是一种含铜的多酚氧化酶，属于铜蓝氧化酶家族，广泛分布于真菌和高等 植物中，具有较强的氧化还原能力，在纸浆生物漂白，环境污染物降解和木质纤维素降解以 及生物检测方面有非常广泛的应用。
测定原理：

漆酶分解底物 ABTS 产生 ABTS 自由基，在 420nm 处的吸光系数远大于底物 ABTS，测定 ABTS 自由基的增加速率，可计算得漆酶活性。 自备实验用品及仪器 天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、震荡仪。
试剂组成和配制：

试剂一：液体 40mL×1 瓶，4℃保存。 工作液：粉剂×2 瓶，4℃避光保存，临用前每瓶加 10mL 试剂一溶解。
样品处理：
 新鲜土样风干，过 30-50 目筛。 
测定操作：
 1. 可见分光光度计/酶标仪预热 30min，调节波长到 420nm，蒸馏水调零。 对照管 测定管 样本（g） 0.02 0.02 试剂一（μL） 250 工作液（μL） 250 37℃震荡反应 10min，冰浴 5min，10000g，4℃离心 5min，分别取上清 200μL 于 420nm 处 测定吸光值，记为记为 A 对照和 A 测定。△A=A 测定-A 对照
计算公式：
 a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下 酶活性定义：每克土壤每分钟氧化 1nmol 底物 ABTS 所需的酶量为一个酶活力单位（U）。 SL 活性（nmol/min /g 土样）= d A ? ? ? ×V 反总÷W÷T= 0.694×△ A÷W ε：ABTS 毫摩尔消光系数：36L/mmol/cm；d：比色皿光径，1cm；V 反总：反应总体积， 0.25mL；W：样本质量，g；T：反应时间，10min b. 用 96 孔板测定的计算公式如下 酶活性定义：每克土壤每分钟氧化 1nmol 底物 ABTS 所需的酶量为一个酶活力单位（U）。 SL 活性（nmol/min /g 土样）= d A ? ? ? ×V 反总÷W÷T= 1.388×△ A÷W ε：ABTS 毫摩尔消光系数：36L/mmol/cm；d：比色皿光径，0.5cm；V 反总：反应总体积， 0.25mL；W：样本质量，g；T：反应时间，10min 注意事项 1. 工作液需临用前配制，并且尽快使用，4℃保存一周，若变色则不能使用。 2. 测定之前进行预实验，若吸光值较高，请将样品用提取液进行适当的稀释再测定，并在 计算公式中乘以稀释倍数。
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