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产地 | 国产 |
品牌 | 谷研 |
货号 | GOY-SH324-B |
用途 | 仅供科研实验 |
英文名称 | SLAP |
包装规格 | 50管/24样 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
别名 | 土壤亮氨酸氨基肽酶(SLAP)测试盒 |
分子式 | |
是否进口 | 否 |
土壤亮氨酸氨基肽酶(SLAP)测试盒可见分光光度法
商品属性:
检测方法 |
规格 |
货号 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
GOY-SH324-B |
测定意义:
S-LAP 是一类能水解肽链 N-末端为亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP 活性变化与机
体某些病理状态密切相关。
测定原理:
S-LAP 分解 L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在 405nm 有 吸收峰,通过测定
吸光值升高速率来计算 S-LAP 活性。
自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸
馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 65mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,-20℃保存;
测定操作:
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 405nm,蒸馏水调零。
2、 在试剂二瓶中加入 30mL 试剂一充分溶解(如较难溶解,可 60℃水浴加热约 30min 促进
溶解);在 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上;用不完的试剂分装
后-20℃保存,禁止反复冻融。
3、 操作表
试剂名称 对照管 测定管
新鲜土样(g) 0.2 0.2
试剂一(μL) 1200
试剂二(μL) 1200
混匀, 37℃振荡反应 1h 后,8000g 4℃离心 10min,取 1mL 上清液于比色皿中,405nm 处
测定吸光值 A,计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。
计算公式:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
单位的定义:每天每 g 土样每天生成 1 μmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
S-LAP(μmol/d /g 土样)=ΔA×V 反总÷(ε×d)×106
÷W÷T=14.8×ΔA
V 反总:反应体系总体积,1.2×10-3
L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103
L / mol /cm;
d:比色皿光径,1cm;T:反应时间,1h=1/24d; W:样本质量,0.2g。
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