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产地 | 国产 |
品牌 | 谷研 |
货号 | GOY-SH323 |
用途 | 仅供科研实验 |
英文名称 | |
包装规格 | 100管/48样 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
别名 | 土壤碱性木聚糖酶测试盒/土壤碱性半纤维素酶测试盒 |
分子式 | |
是否进口 | 否 |
土壤碱性木聚糖酶测试盒/土壤碱性半纤维素酶测试盒微量法
商品属性:
检测方法 |
规格 |
货号 |
微量法 |
100管/48样 |
GOY-SH323 |
测定意义:
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素 酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有 效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用 于酿造和饲料工业中,BAX 一般分离自最适生长 pH 为 9 -11 的微生物。
测定原理:
BAX 在碱性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,在沸水浴条件下进一步与 3,5-二
硝基水杨酸发生显色反应,在 540nm 处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还
原糖量成正比,通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率,可计算 BAX 活力。天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔 板。
试剂组成和配制:
缓冲液:液体 15mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 3mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 12mL×1 瓶,4℃避光保存。
样品处理:
新鲜土样风干,过 30-50 目筛。
测定操作:
1、 分光光度计/酶标仪预热 30min,调节波长至 540nm。
2、操作表
对照管 测定管
土样(g) 0.02 0.02
缓冲液(μL) 150 100
试剂一(μL) 50
混匀,50℃震荡反应 30min,立即 90℃水浴 10min,8000g,25℃离心 10min,取上清 100μL
试剂二(μL) 100 100
混匀,90℃水浴中显色 5min,取 180μL 于微量石英比色皿/96 孔板测定 540nm 处吸光值 A,
分别记为 A 对照管、A 测定管,△A=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。
计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y = 2.8432x - 0.0293,R
2 = 0.9985
酶活定义:50℃,pH9.0 条件下,每克土壤每天分解木聚糖产生 1μmol 还原糖所需的酶量
为一个酶活单位。
S-BAX 活力(μmol/d /g 土样)=(△A+0.0293)÷ 2.8432×V 反总×10
3÷ W÷T÷ 150 = 16.88×(△A +0.0293)÷ W
V 反总:反应总体积,0.15mL;T:反应时间,1/48d;1000:1mmol/L =10
3μmol/L;150:
木糖分子量。
b.用 96 孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y = 1.4216x - 0.0293,R
2 = 0.9985酶活定义:50℃,pH9.0 条件下,每克土壤每天分解木聚糖产生 1μmol 还原糖所需的酶量
为一个酶活单位。
S-BAX 活力(μmol/d /g 土样)=(△A+0.0293)÷ 1.4216×V 反总×10
3÷ W÷T÷ 150 = 33.76×(△A +0.0293)÷ W
V 反总:反应总体积,0.15mL;T:反应时间,1/48d;1000:1mmol/L =10
3μmol/L;150:
木糖分子量。 注意事项:
1. 保证震荡反应 30min,使酶与底物充分接触。
2. 注意 90℃水浴防止爆开,以免改变反应体系。
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