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产地 | 国产 |
品牌 | 谷研 |
货号 | GOY-SH328-B |
用途 | 仅供科研实验 |
英文名称 | |
包装规格 | 50管/24样 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
别名 | 土壤漆酶测试盒 |
分子式 | |
是否进口 | 否 |
土壤漆酶测试盒可见分光光度法
商品属性:
检测方法 |
规格 |
货号 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
GOY-SH328-B |
测定意义:
漆酶(Laccase)是一种含铜的多酚氧化酶,属于铜蓝氧化酶家族,广泛分布于真菌和高等
植物中,具有较强的氧化还原能力,在纸浆生物漂白,环境污染物降解和木质纤维素降解以
及生物检测方面有非常广泛的应用。
测定原理:
漆酶分解底物 ABTS 产生 ABTS 自由基,在 420nm 处的吸光系数远大于底物 ABTS,测定
ABTS 自由基的增加速率,可计算得漆酶活性。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、震荡仪。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。
工作液:粉剂×2 瓶,4℃避光保存,临用前每瓶加 25mL 试剂一溶解。
样品处理 :
新鲜土样风干,过 30-50 目筛。
测定操作:
1. 分光光度计预热 30min,调节波长到 420nm,蒸馏水调零。
对照管 测定管
样本(g) 0.1 0.1
试剂一(μL) 1000
工作液(μL) 1000
30℃震荡反应 10min,冰浴 5min,10000g,4℃离心 10min,取出 800μL 反应液立即于
420nm 处测定吸光值,分别记为 A1,A2。△A=A2-A1
计算公式:
酶活性定义:每克土壤每分钟氧化 1nmol 底物 ABTS 所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
SL 活性(nmol/min/g 土样)=
d
A
?
?
?
×V 反总÷W÷T= 2.78×△ A÷W
ε:ABTS 毫摩尔消光系数:36L/mmol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应总体积,
1mL; W:样本质量,g;T:反应时间,10min
注意事项
1. 工作液需临用前配制,并且尽快使用,4℃保存一周,若变色则不能使用。
2. 测定之前进行预实验,若吸光值较高,请将样品用提取液进行适当的稀释再测定,并在
计算公式中乘以稀释倍数。
3. 反应完立即记录数据,以免造成逆向反应影响实验结果。
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