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产地 | 国产 |
品牌 | 谷研 |
货号 | GOY-SH355 |
用途 | 仅供科研实验 |
英文名称 | SNPT |
包装规格 | 100管/48样 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
别名 | 土壤中性蛋白酶(SNPT)测试盒 |
分子式 | |
是否进口 | 否 |
土壤中性蛋白酶(SNPT)测试盒微量法
商品属性:
检测方法 |
规格 |
货号 |
微量法 |
100管/48样 |
GOY-SH355 |
测定意义:
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化,其
水解产物是高等植物的氮源之一。S-NPT 在中性环境下催化蛋白质水解,与土壤有机质含量、
氮素及其他土壤性质有关。
测定原理:
中性条件下,S-NPT 可将酪蛋白水解产生酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸化合物
生成钨蓝;在 680nm 有特征吸收峰。
实验中所需仪器及设备:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、微量石英比色皿/96 孔板、
双蒸水
试剂组成和配制:
试剂一:液体 20mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 6ml 蒸馏水充分溶解;用不完的试剂 4℃保存;
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 2mL 试剂七,沸水浴加热溶解,然后加入 8ml
试剂一,充分混匀备用,用不完的试剂 4℃保存;
试剂四:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 30ml 蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂 4℃
保存;
试剂五:液体 8mL×1 瓶,4℃保存;
试剂六:液体 1.5mL×1 支,0.05mg/ml 标准酪氨酸溶液,4℃保存;
试剂七:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
样品处理:
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。
测定操作:
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 680nm,蒸馏水调零。
2、样本测定:
试剂名称 测定管 对照管
风干土样(g) 0.02 0.02
试剂一(μL) 150
试剂三(μL) 150
混匀后,40℃水浴 30min,振荡 5-6 次,使土样与反应液充分接触
试剂二(μL) 50 50
混匀,8000g 25℃离心 10min,取上清液,在 EP 管中加入下列试剂
测定管 对照管 标准管
上清液(μL) 60 60
试剂六(μL) 60
试剂四(μL) 280 280 280
试剂五(μL) 60 60 60
混匀,40℃水浴 20min,8000g 25℃离心 10min,取上清液 200μL,680nm 下读取各管吸光值 A
注意:标准管只需测一次。每个测定管设一个对照管。
计算公式:
单位定义:每天每 g 土样中产生 1mg 酪氨酸为一个 S-NPT 活力单位。
S-NPT(mg/d/g 土样)=C 标准×(A 测定管-A 对照管)÷A 标准管×V 反总÷W÷T=24×(A 测定管-A
对照管)÷A 标准管
C 标准管:标准管浓度,0.05mg/mL;V 反总:反应体系总体积,0.4mL;T:反应时间,
30min=1/48d; W:样本质量,0.02g。
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