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产地 | 国产 |
品牌 | 谷研 |
货号 | GOY-SH354-B |
用途 | 仅供科研实验 |
英文名称 | |
包装规格 | 50管/24样 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
别名 | 土壤植酸酶测试盒 |
分子式 | |
是否进口 | 否 |
土壤植酸酶测试盒可见分光光度法
商品属性:
检测方法 |
规格 |
货号 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
GOY-SH354-B |
测定意义:
植酸酶(phytase)是催化植酸及其盐类水解为肌醇与磷酸(盐)的一类酶的总称,属磷酸
单酯水解酶,它能将食品和饲料中植酸及其盐转化为可供有机体利用的有效磷,降低粪便中
的磷含量,减轻对环境的污染,改善营养成分的吸收和利用,因此具有极其广泛的研究和应
用价值。
测定原理:
植酸酶在一定温度和 pH 值条件下,水解底物植酸钠生成无机磷与肌醇衍生物,无机磷在酸
性环境中与钼酸铵显色剂反应生成蓝色复合物,在 700nm 处有特征吸收峰,根据 700nm 处
吸光值变化可计算得植酸酶活性。 自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅,甲苯(不允许快递)。
试剂组成和配制:
缓冲液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1 瓶,4℃避光保存,临用前加缓冲液 30mL 配制,现用现配;用不完的试剂
4℃保存一个月。
试剂二:液体 30mL×1 瓶,4℃保存。
显色剂:粉剂×6 瓶,4℃避光保存,临用前根据用量每瓶加 1mL 双蒸水溶解,再加 4mL 试
剂二混匀。
样本处理:
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。
测定操作:
对照管 测定管
样本(g) 0.06 0.06
甲苯(μL) 40 40
振荡混匀,室温放置 15min
缓冲液(μL) 1000
试剂一(μL) 1000
混匀,37℃孵育 24h,10000g,4℃离心 5min,取上清
上清 500 500
显色剂(μL) 500 500
混匀,静置 15min,测定 700nm 处吸光值,△A=A 测定管-A 对照管。
每个测定管设一个对照管。
计算公式:
标准曲线:y = 1.759x + 0.0084,R
2 = 0.9977;x 为标准品浓度(μmol/mL),y 为吸光值△A。 酶活性定义:在 37℃,pH5.5 的条件下,每克土样每小时从 5mmol/L 的植酸钠溶液中释放
出 1μmol 的无机磷为一个酶活力单位。
植酸酶活性(μmol/d /g 土样)=(△A-0.0084)÷1.759×V 反总÷W÷T
=9.84×(△A-0.0084)V 反总:反应总体积,1.04mL;T:反应时间,1d;W:样本质量,0.06g。 注意事项
1、显色剂需要临用前根据用量配制,每一瓶是 5 个样本的用量,新配制的显色剂若有颜色
则已经污染或者试剂过期,应放弃使用。
2、ΔA 线性范围为 0.01-1。
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