土壤脂肪酶(SLPS)测试盒可见分光光度法

商品属性：

测定意义：

LPS 又称甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和单酯）。LPS 广泛的存在于各种生物中。
测定原理：

LPS 催化油酯水解成脂肪酸，利用铜皂法测定脂肪酸生成速率，即可计算 LPS 活性。 自备仪器和用品： 研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、甲 苯 100mL、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：

试剂一：液体 90mL×1 瓶，4℃保存。 试剂二：液体 14mL×1 瓶，4℃保存。每次使用前用震荡混匀器剧烈震荡 20min。 试剂三：甲苯 100mL×1 瓶，4℃保存（自备）。 试剂四：液体 20mL×1 瓶，4℃保存。 标准品：液体 10μL×1 瓶，10 μmol/mL 的标准溶液，4℃保存。临用前加入 3.168 mL 甲苯， 充分溶解。 
样本处理：
 建议称取约 0.1g 土样，加入 1mL 试剂一进行冰浴匀浆，再用回旋式振荡器振荡提取 15min， 4℃，4000g 离心 10min，取上清待测。
测定操作：
 1. 分光光度计预热 30 min 以上，调节波长到 710 nm，蒸馏水调零。 2. 试剂一和试剂二置于 37℃水浴预热 30min 以上。 3. 在 5mL EP 管中依次加入下列试剂 试剂名称（μL） 空白管 测定管 蒸馏水 375 样本 125 试剂一 750 750 试剂二 250 37℃振荡反应 10 min 试剂三 2000 2000 37℃振荡反应 10 min 后，8000g，25℃，离心 10min，取上清液 试剂名称（μL） 空白管 测定管 标准管 上清液 1200 1200 标准品 1200 试剂四 300 300 300 37℃振荡反应 5 min 后，静置 5min，取 800μL 上层液加入 1 mL 玻璃比色皿，于 710nm 处 测定吸光值。 注意：空白管和标准管只需测定一次。
计算公式：
 活性单位定义：37℃中每克土样每分钟水解橄榄油生成 1μmol 脂肪酸为一个酶活单位。 S-LPS (μmol/min/g 土样) = [C 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷（A 标准管- A 空白管）]×V 反 总÷（W×V 样÷V 样总）÷T =16×[(A 测定管－A 空白管)÷（A 标准管- A 空白管）]÷W C 标准品：10 μmol/mL；V 反总：反应总体积，2mL；V 样：反应中加入样本体积，0.125mL； V 样总：加入提取液体积，1mL；W：样本质量，g；T：催化反应时间，10 min。
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