土壤硝态氮测试盒微量法

商品属性：

测定意义：

硝态氮是指硝酸盐中所含有的氮元素，土壤中的有机物分解生成铵盐，被氧化后变为硝态氮。 土壤中硝态氮是高等植物吸收氮的主要形式之一，其含量直接关系到作物的产量与品质。
测定原理：

在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（PH>12） 呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可比色测定计算得硝态氮含量。 自备实验用品及仪器 蒸馏水、天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、振荡仪。 
试剂组成和配制：

试剂一：粉剂×2 支，4℃避光保存。临用前根据用量每支加 1mL 浓硫酸充分溶解。 试剂二：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。 
样本处理：
 按照土壤质量（g）：蒸馏水体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 新鲜土样，加入 1mL 蒸馏水）加入蒸馏水，置于振荡仪中振荡提取 1h，25℃，10000g 离心 10min，取上清 待测。
测定操作：
 1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 410nm，蒸馏水调零。 2、 操作表（于 EP 管中加入下列试剂） 空白管 测定管 样本（μL） 10 蒸馏水（μL） 10 试剂一（μL） 20 20 充分混匀，25℃静置 30min 试剂二（μL） 475 475 混匀，涡旋振荡，使出现的沉淀充分溶解，转移 200uL 至微量石英比色皿/96 孔板中测定 410nm 处吸光值 A，△A=A 测定管-A 空白管
计算公式：
 a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下 标准曲线：y=0.0156x+0.0073，R 2 =0.9997 NO3 —— N 含量（mg/kg 鲜重）=（△A-0.0073）÷ 0.0156÷（W÷V 样总） =64.1×（△A-0.0073）÷W V 样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g b. 用 96 孔板测定的计算公式如下 标准曲线：y=0.0078x+0.0073，R 2 =0.9997 NO3 —— N（mg/kg 鲜重）=（△A-0.0073）÷ 0.0078÷（W÷V 样总） =128.2×（△A-0.0073）÷W V 样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g 注意事项 1. 硝酸根不为土壤胶体吸附，且易溶于水，很容易在土壤内部移动，所以测定此指标时应 注意采样深度一致。2. 土壤经风干或者烘干很容易引起 NO3 —— N 的变化，所以 采用新鲜土壤进行测定， 以准确反映该指标含量。 3. 试剂一配制好后尽快使用，4℃可保存一周。 4. 试剂一和试剂二均具有强腐蚀性，操作时需做好防护措施。 5. 检出限为 100μg/kg。
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