土壤蔗糖酶(SSC)测试盒微量法

商品属性：

测定意义：

S-SC 能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收，其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、 磷含量，微生物数量及土壤呼吸强度密切关，是评价土壤肥力的重要指标。
测定原理：

S-SC 催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与 3,5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物， 在 510nm 有特征光吸收，在一定范围内 510nm 光吸收增加速率与 S-SC 活性成正比。 自备用品： 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、 甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
试剂组成和配制：

试剂一：甲苯 1mL×1 瓶，4℃保存；（自备） 试剂二：液体 7.5mL×1 瓶，4℃保存； 试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前每瓶加入 22mL 蒸馏水充分溶解备用；用不完的试剂 4℃保存； 试剂四：液体 22mL×1 瓶，4℃保存。
样品处理：
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。
测定操作：
试剂名称 测定管 对照管 风干土样（g） 0.03 0.03 试剂一（μL） 5 5 振荡混匀，使土样全部湿润，37℃水浴 15min 试剂二（μL） 75 75 试剂三（μL） 220 蒸馏水（μL） 220 充分混匀，放入 37℃水浴培养 24 小时，10000 g，4℃，离心 5min，取上清液 上清液（μL） 85 85 试剂四（μL） 215 215 充分混匀，95℃水浴 5min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却，蒸馏水稀释 10 倍（可以 吸取 100μL，加入 900μL 蒸馏水稀释；若吸光度大于 4，可以加大稀释倍数），取 200uL 至 微量石英比色皿或 96 孔板中 510nm 处读吸光值 A。计算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测 定管需设一个对照管。
计算公式：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下 标准条件下测定的回归方程为 y = 4.9x -0.062；x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。 单位的定义：每天每 g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个 S-SC 活力单位。 S-SC 活力(mg/d/g 土样)=( ΔA+0.062) ÷4.9×10×V 反总÷W÷T =20.4×(ΔA+0.062) 10：稀释倍数；T：反应时间，1d； V 反总：反应体系总体积：0.3mL；W：样本质量，0.03g。 b.用 96 孔板测定的计算公式如下 标准条件下测定的回归方程为 y = 2.45x -0.062；x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。 单位的定义：每天每 g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个 S-SC 活力单位。 S-SC 活力(mg/d/g 土样)=( ΔA+0.062) ÷2.45×10×V 反总÷W÷T =40.8×(ΔA+0.062) 10：稀释倍数；T：反应时间，1d； V 反总：反应体系总体积：0.3mL；W：样品质量，0.03g。
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