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产地 | 国产 |
品牌 | 谷研 |
货号 | GOY-SH342-B |
用途 | 仅供科研实验 |
英文名称 | SC1 |
包装规格 | 50管/24样 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
别名 | 土壤外切β1,4葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(SC1)测试盒 |
分子式 | |
是否进口 | 否 |
土壤外切β1,4葡聚糖酶/纤维二糖水解酶(SC1)测试盒可见分光光度法
商品属性:
检测方法 |
规格 |
货号 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
GOY-SH342-B |
测定意义:
C1(EC3.2.1.91)存在于细菌、真菌和动物体内,是纤维素酶系的组份之一,C1催化多聚糖
链的末端非还原端释放出纤维二糖和葡萄糖。
测定原理:
采用3,5-二硝基水杨酸法测定C1催化微晶纤维素降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 15mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;
样品测定的准备:
称取约 0.1g 新鲜土样或风干土样,加入 1mL 提取液,进行冰浴匀浆,室温振荡提取 30min,
然后 10000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
测定操作:
1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。
2、加样表(在 EP 管中依次加入下列试剂):
混匀,37℃准确水浴 2h
试剂二 1000 1000
混匀, 90℃水浴 10min(盖紧,防止水分散失),冷却后,测 540nm 下吸光值 A,计
算 ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管需设一个对照管。
计算公式:
标准条件下测定回归方程为 y = 6.4078x - 0.0673;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。
单位的定义:每 g 土样每分钟催化产生 1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-C1 活力(μg /min /g 鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V 反总]÷(W× V 样÷V 样总) ÷T
=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W
1000:1mg/mL=1000ug/mL;V 反总:反应体系总体积,0.55mL; V 样:加入样本体积,
0.05 mL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,120 min;W:样本质量,g。
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