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产地 | 国产 |
品牌 | 谷研 |
货号 | GOY-SH360 |
用途 | 仅供科研实验 |
英文名称 | DHA |
包装规格 | 100管/96样 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
别名 | 脱氢酶(DHA)测试盒 |
分子式 | |
是否进口 | 否 |
脱氢酶(DHA)测试盒微量法
商品属性:
检测方法 |
规格 |
货号 |
微量法 |
100管/96样 |
GOY-SH360 |
测定意义:
脱氢酶(dehydrogenase, DHA) 是一类催化物质氧化还原反应的酶,催化底物通过细胞色素
系统被氧化,释放的能量供机体使用,是生物体取得能量的一种方式。
测定原理:
在细胞呼吸过程中,氢受体 2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium
Chloride, TTC)在脱氢酶作用下接受氢以后,被还原为不溶于水的三苯基甲腙(TTF),TTF
呈现红色,于 485nm 测定其吸光值,即得脱氢酶活性。 自备实验仪器及用品
天平、恒温培养箱或水浴锅、低温离心机、酶标仪、96 孔板、冰、蒸馏水、甲醇(不允许
快递,请用户自备)。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 105mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×2 瓶,4℃避光保存,临用前每瓶加入 55mL 蒸馏水溶解(现配现用)。
试剂三:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:甲醇,自备。
样品处理
取新鲜根系样本,洗净后称取 0.1g,放入 10mL 离心管中。
测定操作:
空白管 测定管
样品(g) 0.1
试剂一(mL) 1
试剂二(mL) 1
充分混匀,37℃避光培养 2h
试剂三(mL) 0.4
混匀,然后取出根样,吸干样本表面水分,放入新的离心管
甲醇(mL) 2 2
40℃浸泡 2h,取 200μL 于 96 孔板,测定 A485,△A=A 测定-A 空白。
计算公式:
标准曲线:y = 0.0211x - 0.0312;R2 = 0.9988;x 为标准品浓度(μg/mL),y 为吸光值。
酶活单位定义:在 37℃时,每克样品每 min 催化产生 1μgTTF 为一个酶活性单位。
DHA(μg/ min /g 鲜重)=(△A+0.0312)÷ 0.0211×V 反总÷W÷T= 0.789×(△A+0.0312)÷W
V 反总:反应总体积,2mL;T:培养时间,120min;W:样品质量,g。
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