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产地 | 国产 |
品牌 | 谷研 |
货号 | GOY-SH357-B |
用途 | 仅供科研实验 |
英文名称 | |
包装规格 | 50管/24样 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
别名 | 土壤中性木聚糖酶测试盒/土壤中性半纤维素酶测试盒 |
分子式 | |
是否进口 | 否 |
土壤中性木聚糖酶测试盒/土壤中性半纤维素酶测试盒可见分光光度法
商品属性:
检测方法 |
规格 |
货号 |
可见分光光度法 |
50管/24样 |
GOY-SH357-B |
测定意义:
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素
酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及 β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进
有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应
用于酿造和饲料工业中,NEX 一般分离自最适生长 pH 为 6-8 的微生物。
测定原理:
NEX 在中性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,在沸水浴条件下进一步与 3,5-二
硝基水杨酸发生显色反应,在 540nm 处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还
原糖量成正比,通过测定反应液在 540nm 吸光值增加速率,可计算 NEX 活力。自备实验用品及仪器
天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅,可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿。
试剂组成和配制:
缓冲液:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 25mL×1 瓶,4℃避光保存。
样品处理 :
新鲜土样风干,过 30-50 目筛。
测定操作:
对照管 测定管
土样(g) 0.1 0.1
缓冲液(μL) 600 400
试剂一(μL) 200
混匀,50℃震荡反应 30min,立即 90℃水浴 10min,8000g,25℃离心 10min,取上清 500μL
试剂二(μL) 500 500
混匀,90℃水浴中显色 5min,1mL 玻璃比色皿,对照管调零,测定 A540。
计算公式:
标准曲线:y = 1.6904x + 0.0058,R
2
= 0.9989
酶活定义:50℃,pH6.0 条件下,每克土壤每天分解木聚糖产生 1μmol 还原糖所需的酶量
为一个酶活单位。
S-NEX 活力(μmol/d/g 土样)=(A540+0.0058)÷ 1.6904×V 反总×103
÷ W÷T÷ 150
= 113.58×(A540+0.0058)÷ W
V 反总:反应总体积,0.6mL;T:反应时间,1/48d;1000:1mmol/L =103
μmol/L;150:木
糖分子量。
注意事项
1. 保证震荡反应 30min,使酶与底物充分接触。
2. 注意 90℃水浴防止爆开,以免改变反应体系。
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