淀粉含量测试盒可见分光光度法

商品属性：

测定意义：

淀粉是植物中糖的主要储存形式，其含量测定对于评价食品营养价值和调查植物体内糖代谢

都有重要意义。
测定原理：

利用 80％乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开，进一步采用酸水解法分解淀粉为葡萄糖，

采用蒽酮比色法测定葡萄糖含量，即可计算淀粉含量。自备仪器和用品:可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵、冰、浓硫酸（不允许快递）和蒸馏水。

试剂组成和配制：

试剂一：液体 50mL×1 瓶，4℃保存；

试剂二：液体 70mL×1 瓶，4℃保存；

试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；
酶液提取：
1、 建议称取约 0.1g 新鲜样本或取 0.1mL 液体样本于研钵中研碎，加入 1mL 试剂一，充分
匀浆后转移到 EP 管中，80℃水浴提取 30min，3000g，25℃离心 5min，弃上清，留沉淀。
2、 沉淀中加入 0.5mL 蒸馏水，放入 95℃水浴中糊化 15min（盖紧，以防止水分散失）。
3、 冷却后，加入 0.35mL 试剂二，25℃提取 15min，振荡 3-5 次。
4、 加入 0.85mL 蒸馏水，混匀，3000g，25℃离心 10min，取上清液待测。
注意：如样本为淀粉含量较高的干样，为保证充分提取，可适当减小取样量，如称取
0.01g~0.02g 干样，加入 1mL 试剂一，其余提取步骤同上。

测定操作：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 620nm，蒸馏水调零。
2、 调节水浴锅至 95 度。
3、工作液的配制：临用前在试剂三中加入 7.5mL 蒸馏水后，缓慢加入 42.5mL 浓硫酸，不
断搅拌，充分溶解，待用；用不完的试剂 4℃保存一周；
4、样本测定：取0.2mL样本和1mL工作液至EP管中，95度水浴10 min（盖紧，防止水分散
失），自然冷却至室温，在620 nm 波长下记录测定吸光度值A。
注意：
1、由于工作液具有强腐蚀性，请谨慎操作。
2、若吸光值大于2，淀粉提取步骤（4）的上清液用提取液稀释后再测定，计算公式中乘以
相应的稀释倍数。
3、提取液的配置：0.35mL 试剂二+1.35mL 水。用多少按照此比例配多少。
4、 检测限为 10μg/g 鲜重或 100ng/mgprot。

计算公式：
标准条件下测定的回归方程为 y = 5.872x - 0.0295；x 为标准品浓度（mg/mL），y 为吸光值。
1、按照蛋白浓度计算
淀粉含量(mg/mg prot)=[(A+0.0295)×V1]÷5.872 ÷(V1×Cpr)=0.17×(A+0.0295) ÷Cpr
2、按样本鲜重计算
淀粉含量(mg/g 鲜重)= [(A+0.0295)×V1] ÷5.872÷(W×V1÷V2) =0.289×(A+0.0295) ÷W
3、 按样本体积计算
淀粉含量(mg/mL)= [(A+0.0295)×V1] ÷5.872÷(V3×V1÷V2) =2.89×(A+0.0295)
V1：加入反应体系中样本体积，0.2mL；V2：加入提取液体积，1.7 mL；Cpr：样本蛋白质
浓度，mg/mL；W：样本质量，g；V3：样本体积，0.1mL

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