小鼠睾丸间质细胞系瘤细胞系MLTC-1供应商

别称 mLTC-1; Murine Leydig Tumor Cell line-1

种属 小鼠

年龄（性别） 雄性

组织来源 睾丸；Leydig细胞；Leydig细胞瘤

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

背景描述 MLTC-1细胞是从C57BL/6小鼠移植的M548OP Leydig细胞    中建立；MLTC-1细胞保留了原始对激素的反应。在人激素(hCG)、黄体激素、霍乱毒素、氟化钠和脒基-5'-亚氨基二磷酸盐处理下，MLTC-1细胞的膜腺苷酸环化酶活性提高；在hCG作用下，MLTC-1细胞还可生成黄体酮。

生物安全等级 1

生长培养基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推荐传代比例 1:3-1:4

推荐换液频率 2~3次/周

倍增时间 ~35-40小时

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

致瘤性 Yes, in C57BL/6 mice.

受体表达情况 chorionic gonadotropin; luteinizing hormone (LH)

基因表达情况 progesterone

保藏机构 ATCC; CRL-2065

1、将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次；
2、PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中，注意收集PBS；
3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）；
4、将培养瓶放入37度培养箱消化（1到2分钟，难消化的细胞适当增加时间）；
5、消化到细胞大部分变圆并脱落，轻敲培养瓶后加入3-4ml完培终止消化；
6、混匀细胞吸出，1000rpm离心3-5min，弃上清；补加1-2ml完培吹匀；
7、按1:2分配到新的培养瓶中，添加6-8ml完培保持细胞生长；

01细胞贴壁较弱
细胞贴壁比较弱，因此在遇到运输低温及震荡、室温静置太长时间、添加的培养基或其他试剂过冷、密度较高、聚集未吹散、加液吹打到细胞面等情况时会出现明显的成片脱落现象，此时若脱落现象不严重应尽快放回培养基继续培养，若呈大片脱落的情况时需要收集细胞重新消化吹散并接种；
建议使用经过包被或者高贴壁培养瓶培养细胞，尽量避免接触低温或密度过高；
02细胞本身偏嗜酸性，消耗培养基较快
细胞在略微偏酸性的环境下生长状态会比偏碱性的好，注意培养基pH控制；
细胞密度达到70%以上时，培养基消耗会很快，主意及时观察并换液；
03细胞生长聚集成岛状
细胞呈岛状聚集生长，逐步向外侧扩散直至完全融合；
04细胞聚团后很难再吹散
细胞传代过程中一定要注意吹散细胞，接种密度不要过高，否则接种后细胞聚团将很难再吹散，会形成类似球状的聚集体贴壁生长，培养条件合适的情况下细胞会逐渐摊开生长，但若培养条件无法有效贴壁，可能会长时间呈球状增殖；