抗体的制备过程：

1. 免疫原的制备

普通的大分子蛋白，通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免疫原。

小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫动物

常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量 时需要用到狗、绵羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集

一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血，家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用采血，家兔、山羊、绵羊可采用采血。

4. 免疫血清的纯化与鉴定

得到的抗血清需要进一步的纯化，利用偶联了抗原的亲和柱进行层析，具有高效，特异性强，纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。

5. 免疫血清的保存

建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价，而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。

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几种抗体概述：

1.抗角蛋白抗体（AKA），又称为抗丝集蛋白抗体或抗角质层抗体。AKA是早期诊断和判断预后的指标之一,其对RA患者的诊断的特异性为94% ,而其敏感性为47% ,并是一种鉴别RA和与多发性相关的丙型的有效检验标记物。

2.抗核周因子( APF)， 是定位于口腔黏附膜细胞胞质内的颗粒性蛋白复合物。可在RA患者的血清和关节液中测出，与性别、年龄无关。APF显示了较强的特异性（73%～99%）和敏感性。用间接免疫荧光法检测，方法精密度较差。

3.抗环瓜氨酸肽抗体（CCP），具有相对好的敏感度和特异性。其实，抗核周因子和抗角蛋白抗体，与CCP在化学结构上具有相关性，它们的表位都含有瓜氨酸，称为瓜氨酸相关自身。

[Ala1]-蛋白酶激活受体-4 (1-6) (小鼠)1,3,5-三咖啡酰奎宁

[Ala2]硫氨(蛋氨)-脑啡肽酰胺棕矢车菊素

[Ala3,11,18, Nle7] 人内皮素-1绵马贯众素ABBA;东北贯众素

[Ala8] - Humanin, [Ala8] - HN,Shna绵马ABA

[Ala9,10, Lys11,12] 糖原合成酶 (1-12)瑞香素;祖师麻素

[Ala9] Autocamtide 2;Autocamtide-2-Related Inhibitory PeptideD-松醇

[Arg91, Ala96] –人髓鞘碱性蛋白 (87 - 99)地索苷; 延龄草苷

[Asn10,Leu11,D-Trp12]-状旁腺激素相关蛋白 (7-34) 酰胺 (人，大鼠)川续断皂苷VI;      木通皂苷D

[Asn670,Leu671]-β/A4淀粉样前体蛋白770 (667-675)大车前苷

[Cys2, Tyr3, Orn5, Pen7-amide]-生长抑素14 (7-14)杯苋甾酮

[D-Ala2, DArg6] 强啡肽A, (1-13), 猪沉香四醇

[D-Ala2,4,Tyr5] -β-酪啡肽(1-5)酰胺,牛异嗪皮啶；异秦皮定；异榛皮定

[D-Ala2,DPro4,Tyr5] -β-酪啡肽(1-5),酰胺丹酚A
hnRNP E2/PCBP2 (D1S5E) Rabbit mAbAcetyl-trans-resveratrol；酰化白藜芦醇Sandwich ELISA, Double Antibody

(-)-Gallocatechin gallate/GCG；没食子儿茶素没食子酯Sandwich ELISA, Double Antibody

Crocin；西红花苷Sandwich ELISA, Double Antibody

Flumequine；氟喹Sandwich ELISA, Double Antibody

Tilianin；田蓟苷Sandwich ELISA, Double Antibody

Clonidine hydrochloride；盐可乐定Sandwich ELISA, Double Antibody

Luteolin-6-C-glucoside；异荭草苷Sandwich ELISA, Double Antibody

Deoxyshikonin；去氧紫草素Sandwich ELISA, Double Antibody

Fenbendazole；芬苯达唑/苯硫咪唑Sandwich ELISA, Double Antibody

Lithocholic Acid；石胆/胆石Sandwich ELISA, Double Antibody

L-5-Hydroxytryptophan；L-5-羟基色氨Sandwich ELISA, Double Antibody

Fangchinoline；防己诺林碱/粉防己素/汉防己素Sandwich ELISA, Double Antibody

Maslinic acid；山楂Sandwich ELISA, Double Antibody

Genkwanin；芫花素Sandwich ELISA, Double Antibody
一抗和二坑的区别：

*抗体就是平常所说的抗体，即能和抗原特异性结合。

*抗体是能和抗体结合的，即抗体的抗体。主要用于检测抗体的存在。

一抗是针对抗原的抗体，二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说，抗原进入机体刺激机体产生免疫应答，由B细胞可以产生与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质。

一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团，而且一抗可以至少结合两种其他基团（底物和二抗）。

一抗：可以特异结合底物，就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。

二抗：可以和一抗结合，并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），则不需要二抗。但这样成本很高，因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记，再来检测一抗。而一抗识别底物。这样，当一抗结合到底物上，就可以通过二抗检测出来。