人子宫颈表皮癌细胞系ME-180品牌

别称 Me-180; ME 180; ME180

种属 人类

年龄（性别） 女性，66岁

组织来源 宫颈表皮样癌网膜转移灶

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

背景描述 ME-180细胞来源于一个细胞集落不规则没有显著的侵染性。单层培养的ME-180细胞间可以观察到带状连接，也注意到有细胞质张力丝。1970年，发现支原体污染并去除。TNF-α抑制ME-180细胞的生长；ME-180细胞含有人病毒DNA，与HPV-39的同源性高于HPV-18。

生物安全等级 2

生长培养基 McCoy's 5A＋10% FBS＋1% P/S

推荐传代比例 1:3-1:4

推荐换液频率 2~3次/周

倍增时间 ~36小时

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

致瘤性 Yes, in nude mice; forms well differentiated epidermoid carcinoma (grade I).

抗原表达情况 Blood Type A; Rh+; HLA A1, A11, B5(+/-), B40

基因表达情况 Oncogenes: p53+; pRB+

保藏机构 ATCC; HTB-33

1、将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次；
2、PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中，注意收集PBS；
3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）；
4、将培养瓶放入37度培养箱消化（1到2分钟，难消化的细胞适当增加时间）；
5、消化到细胞大部分变圆并脱落，轻敲培养瓶后加入3-4ml完培终止消化；
6、混匀细胞吸出，1000rpm离心3-5min，弃上清；补加1-2ml完培吹匀；
7、按1:2分配到新的培养瓶中，添加6-8ml完培保持细胞生长；

01细胞贴壁较弱
细胞贴壁比较弱，因此在遇到运输低温及震荡、室温静置太长时间、添加的培养基或其他试剂过冷、密度较高、聚集未吹散、加液吹打到细胞面等情况时会出现明显的成片脱落现象，此时若脱落现象不严重应尽快放回培养基继续培养，若呈大片脱落的情况时需要收集细胞重新消化吹散并接种；
建议使用经过包被或者高贴壁培养瓶培养细胞，尽量避免接触低温或密度过高；
02细胞本身偏嗜酸性，消耗培养基较快
细胞在略微偏酸性的环境下生长状态会比偏碱性的好，注意培养基pH控制；
细胞密度达到70%以上时，培养基消耗会很快，主意及时观察并换液；
03细胞生长聚集成岛状
细胞呈岛状聚集生长，逐步向外侧扩散直至完全融合；
04细胞聚团后很难再吹散
细胞传代过程中一定要注意吹散细胞，接种密度不要过高，否则接种后细胞聚团将很难再吹散，会形成类似球状的聚集体贴壁生长，培养条件合适的情况下细胞会逐渐摊开生长，但若培养条件无法有效贴壁，可能会长时间呈球状增殖；