免疫荧光技术的实验步骤：

一、准备好试剂与仪器：

磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。

二、实验步骤

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。

2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。

4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

参数规格：

抗体的生活习性：

(1)结合特异性抗原：抗体与其他免疫球蛋白分子区别，就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合，在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。

(2)激活补体：抗体与相应抗原结合后，借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等免疫作用。

(3)结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，产生不同的疚，参与免疫应答。

(4)可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。

(5)具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。

(6)抗体对理化因子的与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在 上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。

实验步骤:

① 滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，10min后弃去，使标本保持一定湿度。

② PhosphoPlus® Sox2 (Ser250/Ser251) Antibody Duet滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间（参考：30min）。

③ 取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸3-5 min，不时振荡。

④ 取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度，一般可用“+”表示：

（-）无荧光；（±）极弱的可疑荧光；（+）荧光较弱，但清楚可见；（++）荧光明亮；（+++ --++++）荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上，而各种对照显示为（±）或（-），即可判定为阳性。

抗体的多样性：

抗体的异质性。抗体的组成极为复杂，是由成千上万、多种多样的免疫球蛋白（Ig）分子所组成。这些Ig分子在形状、大小、结构以及氨基酸的组成和排列上，既相似，又有差别。由于有差别，它们的电泳活性就有很大的变化。

因为抗体具有与抗原决定簇相对应的结合部位（抗原结合簇），所以抗体与抗原的结合具有特异性。另一方面，抗体本身是一种蛋白质，具有本身的氨基酸组成、排列和立体结构，对异种动物来说，它又是抗原。各类Ig都具有可用血清学方法检出的抗原特异性，它们表现出不同的血清学类型。
细胞YES激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）Diethyl Sebacate;Decanedioic acid diethyl ester

组织YES激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）1,4Dichlorobutane;DCB;TetraMethylenedichloride

细胞ZAP70激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）Di(2-ethylhexyl) sebacate;Diisooctyl sebacate;Octoil S;Plexol 201;DOS

组织ZAP70激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）Formic acid

细胞SPHK1激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）Zinc chloride

组织SPHK1激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）Anisole;Methoxybenzene

细胞SPHK2激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）DiethylaMinoethyl cellulose

组织SPHK2激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）Trifluoroacetic acid;Trifluoroethanoic acid;Perfluoroacetic acid;TFA

细胞钙调神经酶（CALCINEURIN；PP2B）活性定比色法定量检测试剂盒CalciuM fluoride;Fluorspar

组织钙调神经酶（CALCINEURIN；PP2B）活性定比色法定量检测试剂盒Sudan IV;Sudan red BB;Scarlet red;Solvent red 24;Oil red Ⅳ;Biebrich scarlet Rfat solube;Fat ponceau;o-Tolylazo-tolylazo-β-naphthol;C.I. 26105

细胞蛋白酶2A（ PP2A）活性比色法定量检测试剂盒FLUORESCEIN DIACETATE

组织蛋白酶2A （PP2A）活性比色法定量检测试剂盒GLYCINEULTRAPURE

细胞钙调神经酶（CALCINEURIN；PP2B）活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒Glycerin;Glycyl alcohol;Trihydroxy propane;Propenyl alcohol

组织钙调神经酶（CALCINEURIN；PP2B）活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒Tetraethylene glycol diMethyl ether;DiMethoxytetraglycol;DiMethoxytetraethyleneglycol;TetraglyMe;Bis(2-Methoxy-ethoxyethyl)ether
PhosphoPlus® Sox2 (Ser250/Ser251) Antibody Duet5水杨,拉秦质量>,BR5Aminosalicylicacid

艾氏剂标准品CAS号：309002250MG英文名称支

杆属Lactobacillussp.酿酒酵母Saccharomycescerevisiae

双脒标准品CAS号：33089611250MG英文名称支

爱普列特（）质量UV法含量测定Epristeride

莠去津标准品CAS号：1912249250MG英文名称支

磺恶羟C48H78O18人蛋白激酶CbetaII(PKCbII)ELISAKit

磺嘧啶C15H20N2O人蛋白基因产物9.5(PGP9.5)ELISAKit

磺噻钠盐C23H24ClN3O5人蛋白C(PC)ELISAKit

混合食蟹猴肝S9(雌性)C8H8O3人蛋白ATP1B4(ATP1B4)ELISAKit

混合食蟹猴肝S9(雄性)C22H26N2O2人蛋白(肽酰脯氨酰顺/反异构酶)NIMA结合1(PIN1)ELISAKit

吉非罗齐1OβD葡萄糖苷烯酯C27H45NO2人蛋白DJ1(PARK7)ELISAKit

吉非罗齐1Oβ葡萄糖苷C7H8O人弹性蛋白酶(Elastase)ELISAKit

加巴喷内酰C24H40O4人胆(Cholicacid)ELISAKit

加巴喷相关化合物BC48H78O19人胆转运体样蛋白4(SLC44A4)ELISAKit

加巴喷相关化合物DC20H22O6人胆酰转移酶(ChAT)ELISAKit

加巴喷相关化合物EC15H24O5人胆红素代谢物ELISAKit

加兰他敏N物C18H19NO5人胆固醇7α羟化酶(CYP7A)ELISAKit

加兰他敏βD葡萄糖苷C10H18O人单丝氨蛋白激酶1(LIMK1)ELISAKit