免疫荧光技术的实验步骤：

一、准备好试剂与仪器：

磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。

二、实验步骤

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。

2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。

4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

参数规格：

抗体的生活习性：

(1)结合特异性抗原：抗体与其他免疫球蛋白分子区别，就在于抗体能与相应抗原发生特异性结合，在体内导致生理或病理效应;在体外产生各种直接或间接的可见的抗原抗体结合反应。抗体是靠其分子上的特殊的结合部位与抗原结合的。

(2)激活补体：抗体与相应抗原结合后，借助暴露的补体结合点去激活补体系统、激发补体的溶菌、溶细胞等免疫作用。

(3)结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，产生不同的疚，参与免疫应答。

(4)可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。

(5)具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。

(6)抗体对理化因子的与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在 上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。

实验步骤:

① 滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，10min后弃去，使标本保持一定湿度。

② TSLP (D7U1X) Rabbit mAb滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间（参考：30min）。

③ 取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸3-5 min，不时振荡。

④ 取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度，一般可用“+”表示：

（-）无荧光；（±）极弱的可疑荧光；（+）荧光较弱，但清楚可见；（++）荧光明亮；（+++ --++++）荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上，而各种对照显示为（±）或（-），即可判定为阳性。

抗体的多样性：

抗体的异质性。抗体的组成极为复杂，是由成千上万、多种多样的免疫球蛋白（Ig）分子所组成。这些Ig分子在形状、大小、结构以及氨基酸的组成和排列上，既相似，又有差别。由于有差别，它们的电泳活性就有很大的变化。

因为抗体具有与抗原决定簇相对应的结合部位（抗原结合簇），所以抗体与抗原的结合具有特异性。另一方面，抗体本身是一种蛋白质，具有本身的氨基酸组成、排列和立体结构，对异种动物来说，它又是抗原。各类Ig都具有可用血清学方法检出的抗原特异性，它们表现出不同的血清学类型。
Atractylenolide III

Atractylenolide I

ANEMONIN

Dictamnine

Cantharidin

SMARCD3  肌动蛋白依赖染色质调控因子SMARCD3蛋白抗体

SRFBP1  血清应答因子结合蛋白1抗体

REEP5  受体表达蛋白5/相关蛋白抗体

C5ORF4  5号染色体开放阅读框4抗体

C5orf35  5号染色体开放阅读框35抗体
TSLP (D7U1X) Rabbit mAb双孢蘑菇酿酒酵母Saccharomycescerevisiae

硬脂酯英文名称供检查用支

二洛平（）质量含量测定Loxapinesuccinatesalt

环拉钠英文名称供鉴别用支

人前列成纤维细胞完全培养Caki1(人肾透细胞细胞)

人参二醇英文名称含量测定支

mycTagIP/CoIPKitmyc标签免疫沉淀试剂盒RecombinantSomatostatin(SST)牛α干扰素(IFNα)ELISAKit

MultitaggedProteinLysate/多标签蛋白裂解RecombinantAtaxin1(ATXN1)牛α1性糖蛋白(α1AGP)ELISAKit

MultitaggedProteinLysate(E.coli)/多标签蛋白裂解(E.coli)RecombinantEsophagealCancerRelatedGene4(ECRG4)牛P物质(SP)ELISAKit

MultitaggedProteinLysate(293T)/多标签蛋白裂解(293T)RecombinantRetinolBindingProtein1,Cellular(RBP1)牛N酰βD葡萄糖苷酶(NAG)ELISAKit

MRC5/成纤维细胞RecombinantRetinolBindingProtein3,Interstitial(RBP3)牛N端前脑钠素(NTproBNP)ELISAKit

MountingSolution(aqueous)/水性封片剂RecombinantRetinolBindingProtein4,Plasma(RBP4)牛D乳ELISAKit

MOLT4全细胞裂解RecombinantRetinoblastomaProtein1(RB1)牛C肽(CPeptide)ELISAKit

Molt4/急性淋巴母细胞细胞RecombinantChromograninA(CHGA)牛C反应蛋白(CRP)ELISAKit

MGC803全细胞裂解RecombinantEosinophilChemotacticFactor(ECF)牛5羟色铵/血清素/血清铵(5HT/ST)ELISAKit

MDA231全细胞裂解RecombinantLeptin(LEP)牛Ⅲ型前胶原末端肽(PⅢNP)ELISAKit

MDA231/细胞RecombinantLeptinReceptor(LEPR)牛1脂酰肌醇4,5二二酯酶ζ1(PLCZ1)ELISAKit

MCF全细胞裂解RecombinantDecayAcceleratingFactor(DAF)牛17羟孕酮(17OHP)ELISAKit

MCF7/细胞RecombinantAmphiregulin(AREG)牛1,25二羟基维生素D3(1,25DHVD3)ELISAKit