人食管鳞癌细胞系KYSE-150规格

别称 KYSE 150; KYSE150; Kyse150; KY150

种属 人类

年龄（性别） 女性，49岁

组织来源 食管

生长特性 贴壁细胞

细胞形态 上皮细胞样

背景描述 Established from the poorly differentiated esophageal squamous cell carcinoma resected from upper (cervical) esophagus of a 49-year-old Japanese woman after receiving radiotherapy (tumor was invading contiguous structures); described as carrying amplified oncogenes, c-erb-B (8x) and cyclin D1 (4x) and producing tumors in nude mice.

生物安全等级 1

生长培养基 RPMI-1640＋Ham's F-12＋10% FBS＋1%P/S

推荐传代比例 1:4-1:8

推荐换液频率 2~3次/周

倍增时间 ~13.7小时 (PubMed=1728357); 23小时 (PubMed=25984343);

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

致瘤性 Yes, in nude mice

保藏机构 DSMZ; ACC-375

1、将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次；
2、PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中，注意收集PBS；
3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）；
4、将培养瓶放入37度培养箱消化（1到2分钟，难消化的细胞适当增加时间）；
5、消化到细胞大部分变圆并脱落，轻敲培养瓶后加入3-4ml完培终止消化；
6、混匀细胞吸出，1000rpm离心3-5min，弃上清；补加1-2ml完培吹匀；
7、按1:2分配到新的培养瓶中，添加6-8ml完培保持细胞生长；

01细胞贴壁较弱
细胞贴壁比较弱，因此在遇到运输低温及震荡、室温静置太长时间、添加的培养基或其他试剂过冷、密度较高、聚集未吹散、加液吹打到细胞面等情况时会出现明显的成片脱落现象，此时若脱落现象不严重应尽快放回培养基继续培养，若呈大片脱落的情况时需要收集细胞重新消化吹散并接种；
建议使用经过包被或者高贴壁培养瓶培养细胞，尽量避免接触低温或密度过高；
02细胞本身偏嗜酸性，消耗培养基较快
细胞在略微偏酸性的环境下生长状态会比偏碱性的好，注意培养基pH控制；
细胞密度达到70%以上时，培养基消耗会很快，主意及时观察并换液；
03细胞生长聚集成岛状
细胞呈岛状聚集生长，逐步向外侧扩散直至完全融合；
04细胞聚团后很难再吹散
细胞传代过程中一定要注意吹散细胞，接种密度不要过高，否则接种后细胞聚团将很难再吹散，会形成类似球状的聚集体贴壁生长，培养条件合适的情况下细胞会逐渐摊开生长，但若培养条件无法有效贴壁，可能会长时间呈球状增殖；