以下是大鼠角膜上皮细胞培养试剂盒说明书产品说明：

大鼠角膜上皮细胞培养试剂盒说明书【Rat EyePrimaCell：Normal Corneal Epithelial Cells】

大鼠角膜是*的无血管的组织，具有透明的特性和合成许多蛋白的功能。分三层细胞层，外层即是上皮细胞。其中，角膜上皮细胞能参与先天性免疫，能感应病原体存在并发出信号从而激活角膜防御系统。角膜上皮细胞能高效表达醛脱氢酶，防止UV-和4-羟基壬烯醛对细胞造成伤害。大鼠角膜上皮细胞传5代仍可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。 利用本公司试剂盒中提供的角膜组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的角膜组织能使得角膜组织中上皮细胞的一些功能特性发生改变，从而将上皮细胞分离开来。
本试剂盒适用于分离培养大鼠角膜上皮细胞。本体系提供了*的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以*程度地降低所培养的上皮原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠角膜上皮细胞培养试剂盒适合于培养大鼠的角膜上皮细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM组大鼠角膜上皮细胞织解离液（3×1ml） （2）大鼠角膜上皮细胞组织处理缓冲液（100ml） （3）FibrOutTM大鼠角膜上皮细胞成纤维抑制剂（1m
细胞培养方法：

1、大鼠角膜上皮细胞培养试剂盒说明书细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；

③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；

⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏：

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；

④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

注意事项：

冻存细胞接收后大鼠角膜上皮细胞培养试剂盒说明书的处理：

1.干冰运输，收到细胞后立即转入-80℃冰箱短暂中转或直接复苏；

2.收到细胞后，若发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联系。

复苏细胞接收后的处理：

1.收到细胞后，请首先检查培养瓶是否破损或漏液，培养液是否混浊，如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们。

2.75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后，在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片，若有贴壁细胞脱落，可收集上清离心，将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。

3.建议收到当天不要消化处理，如果细胞长满90%，可选择传代处理。

4.如您收到细胞3天内没有反馈相关问题，出现的细胞问题将不提供免费重发服务。

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大鼠角膜上皮细胞培养试剂盒说明书9号染色体开放阅读框59抗体 C9orf59

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