重组胰蛋白酶酶联免疫吸附测定试剂盒检测前准备工作

重组胰蛋白酶酶联免疫吸附测定试剂盒检测前准备工作：

①请提前 20 分钟从冰箱中取出试剂盒平衡至室温，观察溶液是否有结晶，如果有结晶按提示进行操作。提前 15 分钟打开酶标仪预热。

②稀释液配制

将浓缩标准品&样品稀释液&HRP-抗体稀释液用双蒸水稀释（1：25）。

③洗涤液配制

将浓缩洗涤液用双蒸水稀释（1：25）。

提示：从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象，可用 40℃水浴加热使结晶完全溶解后再配制洗涤液（加热温度不要超过 50℃，使用时洗涤液温度应为室温）。请当日使用。

④标准品配制

将标准品于1000转/分离心1分钟后，加入标准品&样品稀释液 1.0 mL 至冻干标准品中，旋紧管盖，静置 10 分钟后上下颠倒数次，待其充分溶解后，用移液器将其轻轻混匀（浓度为 10 ng/mL）, 然后进行倍比稀释（注：不要直接在反应孔中进行倍比稀释）。建议配制成以下浓度：10、 5、 2.5、 1.25、 0.63、0.312、0.156、0 ng/mL。标准品&样品稀释液直接作为空白孔 0 ng/mL。

提示：溶解和稀释标准品过程中尽量避免产生气泡。

倍比稀释方法

取 7 只 EP 管，每管加入 500 μL标准品&样品稀释液，从 10 ng/mL 的标准品工作液中吸取 500 μL加入含有 500 μL标准品&样品稀释液的 EP 管中混匀配成 5 ng/mL 的标准品工作液，按此步骤往后依次吸取混匀。