小鼠胆固醇酯转移蛋白（CETP）ELISA检测试剂盒的建立，为深入研究脂代谢调控机制提供了重要工具。基于前期实验结果，我们进一步优化了试剂盒的关键技术参数，以确保检测的灵敏度和特异性达到最佳状态。
在包被环节，采用高纯度重组小鼠CETP抗原作为固相载体，通过方阵滴定法确定最佳包被浓度为1.5μg/mL，4℃过夜包被可使抗原结合效率提升30%。封闭液选择含5%脱脂奶粉的PBS缓冲液，能有效降低非特异性背景值。值得注意的是，通过引入新型HRP标记二抗（1:5000稀释），使信号放大系统灵敏度达到0.1ng/mL，较传统方法提高两个数量级。
样本预处理阶段创新性地加入载脂蛋白抑制剂混合物，可有效防止血清样本中脂蛋白颗粒的干扰。标准曲线采用6个梯度（0.2-50ng/mL），经三次重复验证显示线性相关系数R2＞0.998。针对小鼠血清的特殊性，建议样本稀释比例控制在1:20至1:50区间，此时回收率可达92-105%。
为验证试剂盒的可靠性，我们选取高脂饮食诱导的动脉粥样硬化模型鼠进行测试。结果显示，CETP水平与主动脉斑块面积呈显著正相关（r=0.83，p<0.01），且批内变异系数＜8%，批间变异系数＜12%，完全符合临床前研究要求。该试剂盒现已成功应用于药物筛选实验，为新型降脂药物的研发提供了精准的分子检测平台。
