大巴贝虫探针法荧光PCR检测试剂盒反应五要素

大巴贝虫探针法荧光PCR检测试剂盒反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

抑制蛋白结构域蛋白1抗体
抑制蛋白结构域蛋白2抗体
抑制蛋白结构域蛋白3抗体
抑制蛋白结构域蛋白4抗体
雌二醇抗体
淀粉样蛋白β前体样蛋白2抗体
淀粉样蛋白β前体样蛋白1抗体
转录激活蛋白crsp70抗体
卵巢、胎盘、前列腺、睾丸蛋白22抗体
锚蛋白重复结构域蛋白33B抗体
载脂蛋白C3抗体
细胞凋亡增强核酸酶抗体
染色体脆弱性相关基因抗体
磷酸化蛋白激酶B抗体
铜转运蛋白质β链抗体
酰基辅酶A合成酶家族4抗体
酸性磷酸酶样蛋白2抗体
AHNAK核蛋白2抗体
二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗体
p53诱导蛋白5抗体
锚蛋白重复域5抗体
脑钠通道蛋白2抗体
脑钠通道蛋白4抗体
小肠钠通道蛋白5抗体
APXL蛋白抗体
酸敏感离子通道蛋白3抗体
天门冬氨酸β羟化酶抗体
精氨酸加压素受体2抗体