上海谷研实业有限公司
联系我们
  • 联系人:郭小姐
  • 电 话:021-39596320
  • 邮箱:goy_shanghai@163.com
  • 传真:021-39596320
  • 地 址:上海松江新砖公路1155号
公司动态

ELISA KIT实验条件的选择

发表时间:2018-08-06

在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:


(1)固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。

(2)包被抗体的选择:将抗体吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的*适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值而蛋白量*少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。

(3)酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定。然后再固定其它条件或采取“方阵法”在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。


(4)酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。

 phospho-P53 (Ser315) 蛋白激酶C亚型G抗体

 phospho-P53 (Ser33) 蛋白激酶C抗体

 phospho-P53 (Ser37) 蛋白激酶C α抗体

 phospho-P53 (Ser392) 蛋白激酶C beta 1/2抗体

 phospho-P53 (Ser46) 蛋白激酶B3

 phospho-P53 (Ser6) 蛋白激酶B2

 phospho-P53 (Ser9) 蛋白激酶B(小鼠来源抗体)

 phospho-P53 (Thr18) 蛋白激酶B

 phospho-P53 (Thr81) 蛋白激酶A受体2α亚基抗体

 phospho-p53BP1(Ser25/29) 蛋白激酶A锚定蛋白95抗体


联系方式
手机:15026555973
Q Q:
手机访问官网